检索历史 清除

摘要目的:探讨NF-κB与放射线诱导的人食管癌细胞上皮间质转化之间的关系，为食管癌的临床放疗提供新的靶点及依据。<br>　　方法:采用直线加速器照射食管癌上皮细胞Eca109，累计剂量60Gy，至Eca109R60，并用克隆形成实验检测其放射抗性。显微镜下观察细胞的形态学变化，同时，应用real-time PCR和免疫细胞化学的方法检测食管癌上皮细胞Eca109和 Eca109R60细胞系中NF-κB、E-cadherin和Vimentin基因表达情况。<br>　　结果:<br>　　1在显微镜下观察，与食管癌上皮细胞Eca109相比，Eca109R60细胞的形态更加不规则，呈细长的纺锤体形、极性消失，细胞之间的粘附更加疏松。<br>　　2经过放射线照射之后的食管癌上皮细胞Eca109R60具有放射抗性，其中放射生物学参数SF2为0.94，D0为7.138。<br>　　3食管癌上皮细胞Eca109和Eca109R60中NF-κB、E-cad和Vim基因mRNA的表达情况及相互之间的关系:与未经照射的食管癌上皮细胞Eca109相比，Eca109R60中E-cad基因mRNA表达明显升高(P=0.003)。而Vim基因mRNA的表达下调(P=0.004)。Eca109细胞中NF-κB基因mRNA的表达比Eca109 R60中NF-κB基因mRNA表达减少，两者之间的差异有统计学意义(P=0.004)。相关性分析显示NF-κB与Vim基因mRNA表达之间不具有线性关系(P=0.747)，但其在某种程度上存在正相关性。NF-κB与E-cad基因mRNA表达的也不具有直线关系(P=0.061)，但其在某种程度上呈负相关。<br>　　4 E-cad、Vim和NF-κB在两株细胞中蛋白水平表达的差异结果如下:免疫细胞化学结果显示上皮细胞标志物E-cad和间质细胞标志物Vim均在两株食管癌上皮细胞的胞浆中表达，其中E-cad更多的表达于胞膜上。显微镜下观察与食管癌上皮细胞Eca109相比，Eca109R60细胞系中E-cad染色的阳性表达程度明显减弱，间质细胞标志物Vim在Eca109R60细胞株中阳性染色程度则明显增强。显微镜下观察，与食管癌上皮细胞Eca109相比，NF-κB p65蛋白在Eca109R60细胞株阳性染色程度明显增强。<br>　　结论:<br>　　1经放射线反复照射之后建立的食管癌细胞Eca109R60具有放射抗性。<br>　　2食管癌放射抗性细胞系Eca109R60发生上皮间质转化，其标志物E-cad表达下调， Vim表达上调。<br>　　3 Eca109R60细胞株中NF-κB表达上调，与E-cad表达在某种程度上成负相关，与Vim表达呈正相关，提示EMT可能与NF-κB信号通路相互作用，最终参与食管癌放射抗性的形成。