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摘要目的：<br>　　在软骨组织工程研究的问题中，种子细胞始终是一个至关重要的问题。自体软骨细胞供区有限以及随年龄增长细胞数量和质量下降等问题限制了它的应用。脂肪干细胞(Adipose stromal cells，ADSCs)为多分化潜能的干细胞，具有:①向脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞等分化的能力;②细胞来源广泛，采集容易，增殖迅速;③在长期培养时细胞表型比较稳定，因此有望成为优秀的软骨组织工程的种子细胞[6]。本实验依据组织工程原理利用脂肪间充质干细胞为种子细胞，通过Sox-9序贯转染检测Ⅱ型胶原相应指标加以分析评价。结果将为探索构建三维组织工程椎间盘的研究提供实验依据;对于进一步提升椎间盘退变的生物治疗水平具有重要意义。<br>　　方法：<br>　　一、研究对象<br>　　脂肪来源为健康成年新西兰大耳白兔颈后部皮下脂肪组织，体重2.5千克，雌雄不限。<br>　　二、检测方法<br>　　1、原代培养脂肪间充质干细胞(ADSCs)传代培养并鉴定。<br>　　2、流式细胞仪PI单染法对细胞周期进行测定、免疫荧光法对细胞表型进行测定。<br>　　3、基因转染后通过Western blot法检测Sox-9对ADSCs二型胶原表达的影响。<br>　　三、统计分析<br>　　所有数据采用均数±标准差表示，统计学分析采用SPSS13.0软件分析，以p＜0.05为具有显著性统计学差异。<br>　　结果：<br>　　1、通过细胞培养及传代培养得到本实验所需的细胞，经过流式细胞仪PI单染法对细胞周期进行测定、免疫荧光法对细胞表型进行测定，结果证实得到的是ADSCs细胞。<br>　　2、转染SOX-9组的Ⅱ型胶原表达量明显增多，证明Sox-9有促进ADSCs二型胶原表达的作用。<br>　　结论：<br>　　通过本实验研究证明Sox-9具有促进ADSCs二型胶原表达的作用