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摘要目的:富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(Serum secreted protein acidicand rich in cysteine，SPARC)主要是由脂肪细胞分泌的一种脂肪因子，具有调节细胞增殖、组织分化以及抗黏附作用。最新研究认为SPARC促进了肥胖者代谢失调，并在T2DM发病机制中具有重要作用。我们前期研究发现SPARC不仅与AMPK(AMP-activated protein kinase)相互作用，还参与糖代谢调控，在高脂喂养的Wistar大鼠脂肪中发现SPARC表达增加，且与胰岛素抵抗相关。本实验通过观察SPARC在正常人、单纯肥胖患者、单纯2型糖尿病患者、2型糖尿病伴肥胖患者血清中表达水平，以及非糖尿病患者、2型糖尿病患者肠系膜脂肪组织中SPARC表达水平差异情况，并探讨与临床指标、生化指标相关性，及与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病的关系。<br>　　方法:共选取160名志愿者参加，门诊体检者80名，其中健康对照组(NC组)40名（男22例、女18例），单纯肥胖组（Ob组）40名（男22例、女18例），筛选用糖耐量试验排除糖尿病，并排除高血压及其他内分泌代谢疾病、糖尿病家族史并且NC组BMI＜24 kg/m2、Ob组BMI≥28 kg/m2。内分泌科入院2型糖尿病患者80例，其中单纯2型糖尿病组（DM组）40例（男25例、女15例），2型糖尿病伴肥胖组（DMOb组）40例（男25例、女15例），均符合1999年世界卫生组织(WHO)糖尿病专家委员会报告的糖尿病诊断标准，DM组BMI＜24 kg/m2、DMOb组BMI≥28 kg/m2。4组受检者均排除感染、糖尿病酮症酸中毒，无血液系统疾病、恶性肿瘤病史，无使用激素药物史及手术应激等情况。以上肥胖诊断标准参照2003年《中国成人超重和肥胖症预防控制指南（试用）》。<br>　　另外选择12例肠道手术或胆囊切除的择期手术志愿者，其中6名非糖尿病患者为对照组（Control组），筛选用糖耐量试验排除糖尿病，并排除内分泌代谢病家族史。6名2型糖尿病患者为糖尿病组（T2DM组），均符合1999年世界卫生组织(WHO)糖尿病专家委员会报告的糖尿病诊断标准。2组患者年龄、性别、BMI等相匹配，并排除心血管疾病，肾功能不全或肝脏疾病、高血压、恶性肿瘤、急性炎症、创伤及近期服用干扰糖脂代谢药物者等。经患者同意并签署伦理学知情同意书后收取标本。<br>　　172名志愿者均为禁饮食8-10小时于清晨空腹抽取静脉血。用化学发光法测空腹胰岛素(FINS)，批内和批间CV系数分别＜5.0％％和＜6.5％;用免疫透射比浊法测定RBP4（上海景源医疗器械有限公司），批内CV≤10％，批间CV≤10％％;用氧化酶法测定总胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG);用GPO酶法测定甘油三酯(TG);用均相酶比色法测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);采用高压液相层析技术检测糖化血红蛋白(HbA1C)，批内CV为0.82％，批间CV为0.51％; SPARC用ELISA法检测（试剂盒由厦门慧嘉生物技术有限公司生产）。所有患者均测身高、体重、腰围、臀围、收缩压、舒张压，计算体重指数、腰臀比，并采用稳态模型评估法评定胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)=FINS(mU/L)×FPG(mmol/L)/22.5。<br>　　12名患者用RT-PCR测出各条带的吸光度值，结果以SPARC条带吸光度值/β-actin条带的吸光度值表示，用Western blot通过ECL化学发光系统显色特异性反应条带，结果以SPARC条带的灰度值/β-actin条带的灰度值表示，免疫荧光用免疫荧光显微镜观察拍片，三种实验方法观察SPARC mRNA和蛋白表达水平。<br>　　采用SPSS19.0统计软件进行统计学分析，正态分布的计量单位，如年龄、TC、SBP、DBP、BMI、WHR等用均数±标准差用（x±s)表示，TG、LDL-C、HDL-C、FPG、HBA1c、FINS、HOMA-IR为非正态分布计量资料进行自然对数转换后用中位数（四分位间距）表示。多组间比较用方差分析。相关性分析使用Pearson相关分析法。通过Logistic回归分析评估SPARC与肥胖的关系。两组间比较用t检验，以P＜0.05判定是否有统计学意义，每一项实验将所有标本分别独立重复3次。<br>　　结果:(1)一般临床和实验室资料比较:DMOb组、DM组SPARC水平显著高于NC组(P＜0.01)，DMOb组SPARC水平高于Ob组(P＜0.05)，但DM组与Ob组比较，差异无统计学意义。(2) Pearson相关分析:WHR、BMI、RBP4、TG、FINS、HOMA-IR与SPARC水平呈显著正相关（分别为r=0.231、0.254、0.272、0.184、0.219、0.205，P＜0.05)。(3) Logistic回归分析:将所有对象按照有无肥胖分组后进行Logistic回归分析，结果显示肥胖与血清SPARC(OR=1.003，95％CI1.002-1.005, P=＜0.0001)、RBP4(OR=1.032,95％CI1.005-1.060, P=0.0215)、TG(OR=0.744,95％CI0.624-0.886,P=＜0.0001)、HOMA-IR(OR=1.328,95％ CI1.035-1.703，P=0.025)相关。<br>　　12例手术患者的临床、生化资料比较:T2DM组SPARC水平显著高于Control组(P(0.01)。两组脂肪组织SPARC mRNA表达水平比较:T2DM组脂肪中SPARC mRNA表达强于Control组(P＜0.05)。两组脂肪组织SPARC蛋白表达水平比较:与Control组比较，T2DM组脂肪中SPARC蛋白表达水平更高。免疫荧光结果:T2DM组脂肪细胞内染色多，荧光强度较强且密集，Control组脂肪细胞染色少，荧光强度较弱。表明T2DM组脂肪组织内SPARC表达较Control组明显增加。<br>　　结论:本研究发现2型糖尿病伴肥胖患者血清SPARC水平显著升高，并且SPARC与HOMA-IR呈正相关，2型糖尿病患者脂肪组织中SPARC mRNA和蛋白水平表达明显增加。结果提示SPARC可能与肥胖、胰岛素抵抗及2型糖尿病的形成密切相关。