检索历史 清除

摘要非小细胞肺癌在世界上是癌症相关死亡的主要原因，非小细胞肺癌占肺癌总量的80-85％。吉西他滨是治疗进展期非小细胞肺癌最常应用的药物之一。吉西他滨具有的良好耐受性使他成为维持治疗的较为理想药物。而当作为一线单药治疗时，病人对吉西他滨客观的反应率是16-22％。大多数病人对吉西他滨耐药，所以发现影响吉西他滨个体化治疗敏感性的生物学标志变得非常重要。这样病人能从以吉西他滨为基础性治疗中获益来提高临床治疗效率。在多数有机体中miR调控基因的表达。已经证实在肺癌的肿瘤形成中起着重要的作用。已有报道证实miR调控肺癌细胞的生存和耐药。然而至今无报道认为miR的表达与非小细胞肺癌对吉西他滨药敏直接相关。<br>　　在本项研究中，我们发现三株非小细胞肺癌细胞系(NCI-H1975，NCI-H460，SK-MES-1)表现出对吉西他滨不同的敏感性。我们应用网上的桑格癌症研究中心下载的数据库分析三个非小细胞肺癌细胞系不同的基因表达谱。发现在敏感细胞株中表达明显增加的基因功能主要是细胞粘附(NRP2，CXCR3，CDK5R1，IL32，CDH2)和分泌颗粒(SLCllA1，GP5，CD36，IGF1)。而在耐药细胞株中，表达明显上调的基因功能主要有甲基化的修饰(HIST1H2BF，RAB23，TP53)和氧化还原酶类(TP53I3，CYP27B1，SOD3)。我们从三株肺癌细胞系中提取出RNA，而后利用miR芯片检测吉西他滨敏感的生物学标志。结果表明miR-155，miR-10a，miR-30a，miR-24-2*，miR-30c-2*在敏感的细胞系表达明显上调。而miR-200c，miR-203，miR-885-5p，miR-195，miR-25*在耐药细胞系表达明显上调。我们利用miRanda，miRDB，miRWalk，RNA22，TargetScan五个miRs靶基因预测软件预测这些miRs的靶基因，将五个软件给出的靶基因取交集，而后看预测的靶基因是否与桑格癌症研究中心三个非小细胞肺癌细胞系差异表达的基因预期相一致。推断表达改变的miR调控的差异表达的基因功能主要集中在染色体重组(MAF，HLF，BCL2，IGSF3)，和抗凋亡作用(BCL2，IGF1，IKBKB)、蛋白激酶(NRP2，PAK7，CDK5R1)（所有以上的基因在敏感细胞中表达上调）。小鸟苷三磷酸酶介导信号传导相关基因(GNA13，RAP2A，ARHGAP5，RAB23)，在敏感的细胞中表达下调。我们进行实时PCR验证了微点阵数据，PCR结果表明大部分(8/10)基因的表达趋势与微点阵结果相一致。进一步，我们依据靶基因和miRs表达谱结果绘制了调控关系图。我们的研究或许能够预测吉西他滨药敏的潜在生物学标志，减少不必要的药物副作用和病人的经济负担。同时也可以推测一些治疗靶点来克服吉西他滨治疗的耐药性。