检索历史 清除

摘要研究目的:<br>　　探讨周仲瑛教授经验方“周氏克金岩方”之有效单体人参皂苷Rd在非小细胞肺癌的作用。本研究旨在探讨:①人参皂苷Rd对人非小细胞肺癌细胞株A549、H460细胞活力的抑制作用;②人参皂苷Rd体外对人非小细胞肺癌A549、H460侵袭能力的影响;③体外对人非小细胞肺癌细胞株A549、H460细胞周期的影响及影响周期的蛋白表达以初步探讨其作用机理。<br>　　研究方法:<br>　　①采用MTT法，观察不同浓度的人参皂苷Rd体外作用非小细胞肺癌细胞系A549、H460不同时间后对其细胞活力的影响;②利用高内涵分析软件，观察不同浓度、不同时间作用于A549、H460细胞系的荧光强度以观测其对细胞增殖的影响;③采用细胞黏附人工重组基底膜培养小室（Transwell小室）法，观察不同浓度的人参皂苷Rd对A549、H460侵袭能力的影响;④利用流式细胞仪检测对A549、H460细胞系周期阻滞效应;⑤使用WesternBlot法检测人参皂苷Rd对A549、H460细胞系周期相关蛋白的表达情况。<br>　　研究结果:<br>　　①各个浓度的人参皂苷Rd对人非小细胞肺癌细胞系A549、H460均有不同程度的细胞活力抑制作用，并具有浓度-时间依赖性:作用A549、H460细胞株，药物浓度25-100μmol/L具有明显的抑制作用;48小时抑制率均明显高于24小时;人参皂苷Rd对快速生长的H460抑制作用尤其明显，并与顺铂相比较，具有明显抑制作用。②人参皂苷Rd作用A549、H460后，高内涵分析药物对细胞有明显的抑制作用，呈时-效和量-效关系，尤其对H460作用明显。③人参皂苷Rd作用于A5498h后，侵袭率与空白对照组相比明显降低，并呈浓度依赖性。④与空白对照组比较，人参皂苷Rd作用A549、H460细胞24小时后，出现G0/G1期细胞比例逐渐上升，而S期的比例逐渐下降，细胞周期阻滞于G0/G1期。⑤Western blot显示cyclin D1、cyclin E1、E2F1和CDK2/4能够随着处理浓度的增加，表达下降，而使细胞阻滞在G1期。检测pAKT/AKT的蛋白表达，结果显示磷酸化AKT表达下降，并且p21表达上升、p27表达下降。<br>　　研究结论:<br>　　①人参皂苷Rd具有体外抑制人非小细胞肺癌细胞系A549、H460的增殖作用。②人参皂苷Rd有降低人非小细胞肺癌A549细胞系侵袭能力的作用。③人参皂苷Rd阻滞人非小细胞肺癌细胞株A549、H460细胞周期于G1期。