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摘要目的:<br>　　应用慢病毒介导的RNA干扰技术，在乳腺癌MCF-7细胞中沉默MARCH6基因表达，研究其对MCF-7细胞增殖及细胞周期的影响。<br>　　方法:<br>　　1、靶向MARCH6基因的shRNA慢病毒转染293T细胞后，荧光显微镜下观察荧光量验证转染效率，将转染293T细胞后的慢病毒液感染MCF-7细胞，沉默MARCH6基因表达，荧光显微镜下观察荧光量，初步判断沉默效果;<br>　　2、Real-time PCR和Western blot验证被MARCH6 shRNA慢病毒感染后的MCF-7细胞中MARCH6在转录水平和蛋白水平的表达;<br>　　3、MTT、BrdU细胞增殖实验检测MARCH6 shRNA慢病毒感染后MCF-7细胞后，该细胞的增殖状况;PI染色流式细胞术检测细胞周期分布，阐明MARCH6下调后对MCF-7细胞增殖能力和细胞周期的影响。<br>　　结果:<br>　　1、通过在荧光显微镜下观察，MARCH6 shRNA慢病毒质粒成功转染293T细胞，与同明视野对比，可见70％左右的细胞带绿色荧光;通过荧光显微镜观察，初步判断慢病毒液成功感染MCF-7细胞，与同明视野对比，90％的细胞均带绿色荧光;<br>　　2、Western Blot和Real-Time PCR验证了MARCH6 shRNA慢病毒感染MCF-7细胞后，MARCH6在转录水平和蛋白水平表达显著下降;<br>　　3、MTT实验、BrdU法结果显示MARCH6基因沉默组的MCF-7细胞增殖显著下降(p＜0.01)，流式细胞术分析表明，MARCH6沉默后导致MCF-7细胞出现细胞周期抑制，细胞分裂处于G1期细胞数明显增多，增殖指数显著降低。<br>　　结论:<br>　　应用RNAi技术沉默乳腺癌MCF-7细胞的MARCH6基因后，可以抑制MCF-7细胞的增殖，并引起周期阻滞。提示MARCH6的表达能促进乳腺癌细胞的增殖。