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摘要目的：<br>　　1.研究不同来源SP刺激THP-1细胞前、后IL-8、ICAM-1和IL-10分泌水平的变化以及刺激A549细胞前、后IL-8和ICAM-1分泌水平的变化。<br>　　2.研究不同来源SP刺激THP-1细胞和A549细胞前、后毒力基因cpsA、ply、psaA和pspA表达的变化。<br>　　3.探讨侵袭性SP入侵血液的机制。<br>　　方法：<br>　　1.23株SP为2009年分离自温州医学院附属第二医院的临床SP株，另1株为ATCC49619。上述24株SP置37℃5％CO2环境培养、分纯，用生理盐水分别调浓度至1.0和2.0McFarland。<br>　　2.2.0McFarland的SP用于RNA的提取。收集经传代、培养的THP-1细胞，调浓度至4.0×108/L，取1.0ml加入24孔细胞培养板中，再向其中加入100μl浓度为1.0McFarland的SP，置37℃5％CO2环境分别孵育4h和8h，吸出细胞悬液，4000rpm离心10min取上清液，沉淀物用于RNA的提取。以ELISA法检测上清液中IL-8、ICAM-1和IL-10的浓度。收集经传代、培养的A549细胞，调浓度至3.0×108/L，取1.0ml加入24孔细胞培养板中，再向其中加入100μl浓度为1.0McFarland的SP，置37℃5％CO2环境分别孵育4h和8h，吸出细胞悬液，4000rpm离心10min取上清液，沉淀物用于RNA的提取。以ELISA法检测上清液中IL-8和ICAM-1的浓度。以荧光定量PCR法检测刺激THP-1和A549细胞前、后毒力基因cpsA、ply、psaA和pspA的mRNA，以及16s rRNA。<br>　　3.以SPSS17.0软件对检测结果进行统计分析。<br>　　结果：<br>　　1.SP刺激THP-1细胞后IL-8、ICAM-1和IL-10的浓度高于空白对照。侵袭性和非侵袭性SP相比，刺激THP-1细胞后IL-8、ICAM-1和IL-10的浓度间均未见显著性差异。临床SP株和ATCC49619相比，刺激THP-1细胞后IL-8、ICAM-1和IL-10的浓度间均有显著性差异。SP刺激A549细胞后IL-8和ICAM-1的浓度高于空白对照。侵袭性和非侵袭性SP相比，刺激A549细胞后IL-8和ICAM-1的浓度间均未见显著性差异。临床SP株和ATCC49619相比，刺激A549细胞后IL-8和ICAM-1的浓度间均有显著性差异。<br>　　2.临床SP刺激THP-1和A549细胞后毒力基因cpsA、ply、psaA和pspA的△Ct值均小于刺激前。临床SP株毒力基因cpsA、ply、psaA和pspA的△Ct值与ATCC49619间均有显著性差异。侵袭性和非侵袭性SP相比，刺激细胞后ply、psaA和pspA的△Ct值间有显著性差异。<br>　　结论：<br>　　1.SP刺激上调THP-1细胞分泌IL-8、ICAM-1和IL-10，也上调A549细胞分泌IL-8和ICAM-1。侵袭性和非侵袭性SP在上调THP-1细胞分泌IL-8、ICAM-1和IL-10以及上调A549细胞分泌IL-8和ICAM-1方面均未见显著性差异，而二者均与ATCC49619有显著性差异。<br>　　2.临床SP刺激THP-1和A549细胞后毒力基因cpsA、ply、psaA和pspA的表达均有上调。临床SP株毒力基因cpsA、ply、psaA和pspA的表达与ATCC49619不同。侵袭性和非侵袭性SP毒力基因cpsA、ply、psaA和pspA表达的差异在于ply、psaA和pspA，而且这种差异只在刺激细胞后才表现。<br>　　3.毒力基因ply、psaA和pspA表达的异化可能是侵袭性SP入侵血液的主要原因，而非机体的免疫反应。