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摘要桑黄（Phellinus igniarius）是自然界中珍稀的药用真菌，桑黄多糖是其中的主要生物活性成分，具有抗肿瘤、降血糖和调节免疫功能等活性。<br>　　本研究以培养桑黄菌丝体为出发点，优化桑黄菌丝体的摇瓶发酵培养条件和菌丝体多糖的提取条件、对菌丝体多糖进行分级分离和纯化，并测定各多糖组分的抗氧化、抗肿瘤活性。主要研究结果如下:<br>　　对桑黄菌丝体的摇瓶发酵培养条件进行了优化:得出最佳接种龄为8天，最适碳源为小麦粉，最适氮源为麸皮，摇床转速为135 r/min，装瓶量为100 mL/250 mL，摇瓶培养时间是5天。进行了5L小型罐发酵试验，建立了描述桑黄菌丝体生长规律的动力学模型。<br>　　采用热水浸提法提取桑黄粗多糖（Crude Phellinus igniarius polysaccharides，CIPS），通过正交试验得到桑黄粗多糖的最佳提取方案为:用100℃热水（料液比为1∶15）提取2.5 h，多糖平均得率为14.17％。理化性质分析显示，所得到的桑黄粗多糖是一种不含淀粉、含少量核酸和蛋白、易溶于水、难溶于有机溶剂的吡喃多糖。<br>　　分别采用40％、60％和80％的硫酸铵对桑黄粗多糖进行分级，得到三种级分的多糖分别命名为IPS40、IPS60、IPS80。采用三种抗氧化体系比较CIPS、IPS40、IPS60、IPS80的抗氧化活性。结果显示:IPS40、IPS60、IPS80清除超氧负离子的半抑制率IC50分别为0.395、0.097、0.053 mg/mL;当浓度均为0.4 mg/mL时，CIPS、IPS40、IPS60、IPS80对羟基自由基的清除率分别为50％、13.75％、12.05％、11.83％;还原能力测定中，当浓度均为1.0 mg/mL时，CIPS、IPS40、IPS60、IPS80的还原力分别为0.095、0.101、0.125、0.108。采用MTT法，测定了CIPS及各级分体外抑制HepG2细胞生长作用。当浓度均为100μg/mL时，CIPS、IPS40、IPS60、IPS80对HepG2细胞的抑制率分别为23.19％、35.21％、45.82％、38.51％，以CIPS的抑制率为最低，IPS60的抑制率为最高。<br>　　将抗肿瘤活性最好的IPS60过DEAE-52离子交换层析柱继续纯化后，得到四个馏分分别标记为IPS60-W、IPS60-1、IPS60-2、IPS60-3，得率分别为30％、7％、4％、1.6％。采用高效液相凝胶色谱串联十八角光散射及折光示差检测器，对这四个馏分进行均一性及分子量进行分析。IPS60-W的折光示差和十八角图谱显示出一对称均匀的峰，由此初步推测IPS60-W可能为均一组分;而IPS60-1、IPS60-2、IPS60-3的折光示差和十八角图谱均显示出多个不对称的峰，推测这三个馏分均非均一组分。同时测得IPS60-W的分子量为732.9 KDa，IPS60-1、IPS60-2、IPS60-3的平均分子量分别为38.7、41.8、408.3 KDa。采用气相色谱法对IPS60-W的水解物进行单糖组成分析，IPS60-W的单糖组成为甘露糖、葡萄糖、半乳糖和一种未知单糖，摩尔比为1.57∶8.38∶1.09∶1.00。MTT试验结果显示，当浓度均为100μg/mL时，IPS60-W、IPS60-1、IPS60-2、IPS60-3对HepG2细胞的抑制率分别为60.21％、54.54％、48.43％、56.41％，均高于纯化前的IPS60，其中以IPS60-W对HepG2细胞的抑制率为最高。