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摘要植物激素是小分子天然产物，在低浓度时就能够调节植物的生长和发育。精确测定植物激素的含量，对深入研究其在生物合成、运输、代谢和分子调节机制中的作用日益重要。由于植物基质复杂，植物体中植物激素的含量极低，植物样品的前处理方法仍是制约痕量植物激素分析的一个技术瓶颈，并影响植物学研究。因此，发展高效的样品前处理技术，结合分离检测技术，建立高选择性、高灵敏度、高可靠性的植物激素定性定量分析方法，是推动植物学机理深入研究的关键。<br>　　目前，植物激素的分析通常采用繁琐的样品前处理方法，一般包含过夜浸提、溶剂萃取、固相萃取净化或色谱净化、制备液相色谱纯化等多个步骤，方法萃取效率较低，耗时长（一般需要数天）。鉴于此，本论文致力于发展新型样品前处理方法，结合色谱-质谱联用技术，实现植物样品中赤霉素、油菜素甾醇和细胞分裂素等重要植物激素的高灵敏、高选择分析，取得的主要研究成果如下:<br>　　(1)将基质固相分散（Matrix Solid-Phase Dispersion，MSPD）萃取用于拟南芥中赤霉素的选择提取，并将其与液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)联用，建立了三种赤霉素(GA1，GA3，GA4)的定量分析方法。通过对样品前处理条件、色谱分离条件和质谱检测条件的优化，检测灵敏度达到1.1～4.1 ng/g。用于三份拟南芥实际样品，检测出其中GA1，GA3和GA4的含量分别为11.20～15.14 ng/g，1.15～1.53 ng/g，2.08～3.43 ng/g。方法具有操作简单、选择性好、回收率高等优点。<br>　　(2)采用预装填固相萃取分散剂的方式，结合静态平衡萃取对基质固相分散萃取进行改进，并用于水稻样品中的痕量赤霉素的选择性提取。通过对静态平衡时间，样品与分散剂比例，分散剂材料以及洗脱溶剂的优化，减少了基质效应，获得了更高的提取效率。将其与LC-MS/MS联用分离分析八种赤霉素，检测限达到0.03～0.67 ng/g。八种赤霉素在低添加浓度下回收率为46.6％～117.9％，RSD值在39.3％以下;在较高添加浓度下，赤霉素的回收率分别在69.3％～122.5％(25 ng/g)和85.7％～119.0％(35 ng/g)，其RSD分别小于11.3％和4.6％。结果表明，预装填分散剂和静态平衡萃取能有效提高MSPD过程对痕量赤霉素的萃取效率，降低基质效应，是提高检测灵敏度的有效手段。<br>　　(3)建立了一种串联MSPD-MAX-MCX样品前处理方法，对植物中痕量油菜素甾醇(Brassinosteroid，BRs)进行选择性提取和纯化。MSPD采用反相分散剂，能有效去除植物基质中的中性和疏水性干扰物;随后的串联SPE过程能有效去除基质中的可离子化的干扰物，进而降低对质谱检测的影响。由于MSPD和MAX-MCX过程采用同一种洗脱剂，因此，可以将两者串联实现提取纯化一步完成。该前处理方法完全避免了植物组织过夜溶剂浸提的步骤，将样品前处理时间由传统的数天缩短至几小时。在此基础上，结合LC-MS/MS分离检测技术，建立了一种亚克级植物样品中痕量内源BRs(24-epiBL，24-epiCS，DS，d-epiCS，TE和TY)的高灵敏定量分析方法。对六种内源BRs的检测灵敏度达到0.008～0.04 ng/mL，单次进样的BRs最小检测量为0.04～0.2 pg。采用该方法对孕穗期和成熟期水稻样品进行检测，发现不同生长阶段的水稻样品中BRs含量显示出明显的差异。<br>　　(4)将MSPD与分散固相萃取(dispersive solid-phase extraction，d-SPE)技术相结合，建立了一种分散基质固相萃取(dispersive matrix solid-phaseextraction，DMSPE)新方法。先将样品与固体分散剂一起研磨，然后放入离心管中，加入萃取溶剂离心。在离心过程中，同时完成目标组分的提取和纯化。采用该方法对0.02 g植物样品中的内源和外源细胞分裂素进行快速提取和纯化，获得的上清液使用LC-MS/MS分离检测。对三种细胞分裂素的检测灵敏度达到0.01～0.06 ng/mL，单次进样的CKs最小检测量为0.05～0.30 pg。方法简单可靠，避免对样品过夜溶剂浸提，将样品前处理时间由传统方法的12 h以上缩短至约0.5 h，适用于亚克级植物样品中细胞分裂素的高灵敏度、高选择性检测。