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鸡IL-2基因的cDNA克隆及其真核表达质粒的构建

摘要该实验参照Sundick发表的鸡白细胞介素2(chicken IL-2)核酸序列,设计并合成了一对特异引物,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术,从ConA活化的5周龄HWL-SPF鸡脾细胞中,扩增出长447bp的鸡IL-2cDNA基因,以pUC119为载体,无隆了扩增片段,经PvuII及Scal酶切鉴定及DNA序列测定,确认为鸡IL-2基因,该序列与Sundick报道的序列结果完全一致.然后用BamHI+EcoRI将目的片段从pUC119重组质粒中切下,定向克隆到pcDNA3质粒上,构建了鸡IL-2的真核表达质粒.该研究克隆的鸡IL-2基因系国内首次获得经序列测定证实的鸡IL-2 cDNA克隆,不仅可以作为DNA疫苗的免疫佐剂,且为今后进一步进行鸡IL-2的生物学活性的研究及其应用奠定了基础.

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