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摘要全球因肝癌致死率仅次于肺癌和胃癌，居恶性肿瘤致死率的第3位[1]。此外，肝癌的隐匿性起病、高恶性程度、高死亡率等特点，导致绝大多数患者确诊时已处于中晚期，失去了手术治疗最佳时机。即使将肿瘤切除或进行化学疗法，都无法获得有效的治疗效果。因此，探索新的治疗途径显得尤为重要。肿瘤靶向治疗因能够特异、高效杀伤肿瘤细胞，是目前治疗肿瘤的希望之星。目前靶向结合技术主要是将基因、抗体或多肽等与载体相连，通过表面携带的特异性媒介，使其能靶向的到达目的组织或器官，并与相应的抗原或受体结合，其中，以纳米颗粒作为载体的肿瘤靶向治疗已成为研究热点[2-4]。<br>　　近年来，国内外许多研究[5-6]表明，GPC3作为细胞表面糖蛋白，在正常肝组织和肝炎患者中不表达而在HCC中特异性高表达。由于GPC3单抗对肝癌的免疫治疗正在进行不同的临床阶段[7-10]，充分说明其对细胞表面的GPC3蛋白具有较好的亲和力和特异性结合作用，故可用GPC3单抗介导抗肿瘤药物以设计靶向性的抗肿瘤系统。因此，本论文正是利用载体偶联和抗原抗体的免疫学反应，将与纳米颗粒偶联的GPC3抗体作用于肝癌细胞系HepG2和正常肝细胞L02，与HepG2表面的GPC3蛋白结合，实现了抗体与肝癌细胞的靶向结合，为进一步靶向研究提供支持。<br>　　目的：研究证明GPC3在肝癌细胞和正常肝细胞中的表达差异，并研究GPC3在肝癌细胞中的分布特征，为靶向治疗机制研究奠定理论基础和实验技术支持。<br>　　方法：采用EDC作为中间连接体，利用交联剂碳二亚胺(EDC)可在范德华力用作距离之内的-COOH与-NH2之间形成交联键的特点，诱导载药二氧化硅纳米粒与GPC3单克隆抗体偶联，制备GPC3 antibody-SiO2免疫交联物。采用圆二色谱仪对其表征。HepG2细胞和LO2细胞分别与培养液、SiO2、GPC3 antibody、GPC3 antibody-SiO2，培养一定时间后，利用免疫荧光法检测GPC3在不同细胞中的分布情况。<br>　　结果：制备GPC3 antibody-SiO2复合物，利用圆二色谱仪表征，其抗体变化微弱，进一步证实了GPC3单克隆抗体交联到二氧化硅纳米粒上。SiO2、GPC3antibody、GPC3 antibody-SiO2，空白对照组分别与HepG2细和LO2细胞培养，免疫荧光实验证明在HepG2细胞中加有GPC3抗体和GPC3 antibody-SiO2组呈阳性，而L02细胞四组均呈阴性，仅细胞核染上DAPi。<br>　　结论：GPC3 antibody-SiO2复合物制备成功;免疫荧光检测表明GPC3单克隆抗体，GPC3 antibody-SiO2复合物作用于正常肝细胞和肝癌细胞，能够有效于HepG2细胞表面的GPC3蛋白结合，为特异药物的靶向治疗提供基础;GPC3蛋白主要分布于HepG2细胞细胞膜，少量分布于胞质中。