检索历史 清除

摘要目的:观察eNOS基因第4内含子的27bp VNTR、第7外显子G894T多态性基因型频率和等位基因频率在中国广西汉族人群中的分布特点，分析其与Perthes病发病风险的关系，旨在探讨Perthes病的病因和发病机制，从遗传分子生物学角度为Perthes病的防治提供一个新思路和新途径。<br>　　方法:本研究采用病例对照研究，分别设对照组、Perthes病组。选择广西医科大学第一附属医院创伤骨科门诊和病房住院就医的2013年10月至2014年9月Perthes病患儿80例。另选健康体检门诊人群100例作为对照组，其年龄、性别与Perthes病组相匹配。两组人群都排除有明显的血管疾病史。两组人群均遵循了知情同意的原则。所有符合标准的研究人群均抽取外周静脉2ml EDTA抗凝全血，应用试剂盒提取白细胞基因组DNA。采用聚合酶链(PCR)或采用聚合酶链反应限制片段长度多态性(PCR-RFLP)技术测定两组人群的eNOS基因27bp VNTR、 G894T多态性的基因型，在2％的琼脂糖凝胶中稳压电泳，在紫外成像仪上检测结果，分析记录电泳图谱，根据电泳条带bp值判断每个样本基因型。以基因计数法计算Perthes病患儿和与之相匹配的正常人群中的基因型及等位基因频率，用SPSS16.0统计软件对两组人群之间进行用x2检验及Hardy-Weinberg平衡(HWE)以评估标本群体代表性，各基因型及等位基因频率分布差异行x2检验，并计算比值比(0R)及95％可信区间(95％CI)，以估算基因位点的变异对Perthes病发生的相对危险度。并将自己的研究结果与国内外相关的研究结果相比，观察eNOS基因多态性是否存在有种族及民族差异。结果:Perthes病组及正常对照组的基因型及等位基因分布均符合Hardy-Weinberg平衡。Perthes病组中eNOS基因27bp VNTR等位基因的bb型、ab型的出现频率分别为:58例(72.5％)、22例(27.5％);正常对照组86例(86％)、14例(14％)。稀有的aa型在本研究中未发现。ab基因型较bb基因型对Perthes病的OR为2.33(95％CI1.10-4.92)。a等位基因型较b等位基因对Perthes病的OR为2.12(95％CI1.05-4.29)。经PCR-RLFP分析二组的eNOS外显子7 G894T等位基因的GG野生型、GT杂合型、TT纯合突变型的出现频率分别为:Perthes病组50例(62.5％)、28例(35％)、2例(2.5％)，正常对照组81例(81％)、17例(17％)、2例(2％);GT基因型较GG基因型对Perthes病的OR为2.67(95％CI1.33-5.36)。T等位基因型较G等位基因对Perthes病的OR为2.13(95％CI1.18-3.87)。广西汉族人群与其他种族人群的eNOS基因27bp VNTR和外显子7 G894T基因型频率、等位基因频率经x2检验，差异有统计学意义(P＜0.05)。<br>　　结论:1.首次在中国人群中发现eNOS基因和Perthes病的产生可能存在关联性。2.发现eNOS基因内含子4的27bp VNTR多态性序列中ab基因型使Perthes病的发生风险增加，外显子7的G894T多态性序列中GT杂合基因型也是Perthes病的危险因素之一。3.中国广西地区汉族人群存在eNOS基因27bp VNTR和外显子7 G894T基因多态性，此多态性分布存在着种族及民族差异性。