摘要背景和目的:<br> 宫颈癌是仅次于乳腺癌的女性常见恶性肿瘤,侵袭转移影响是宫颈癌患者疗效和预后的关键因素。因此,探索抑制宫颈癌侵袭转移的方法对于改善宫颈癌患者的疗效和生存质量具有重要的意义。近年来,中药的抗肿瘤作用越来越受到受到关注,黄芪多糖(astragalus polydsaccharide,APS)是黄芪的主要活性成分之一。越来越多的研究证实APS具有抗肿瘤活性。但是,APS的抗肿瘤作用机制尚未完全明了。目前,尚未见APS对宫颈癌Hela细胞迁移侵袭能力抑制作用及相关机制的研究报道。本研究旨在探讨APS对宫颈癌Hela细胞迁移侵袭能力的抑制作用及相关机制,以期为APS在宫颈癌治疗中的应用提供科学依据。<br> 方法:<br> 1.提取APS并定量。<br> 2.根据预实验的结果,实验组:200μg/mL的APS诱导48h的宫颈癌Hela细胞,对照组:不加药的宫颈癌Hela细胞。<br> 3.通过划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验探讨APS对宫颈癌Hela细胞迁移侵袭能力的抑制作用。<br> 4.通过Western blotting方法观察APS处理前后宫颈癌Hela细胞中钙粘附蛋白E(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、MMP-2等与肿瘤迁移侵袭相关基因蛋白水平表达的变化。<br> 结果:<br> 1.制备的APS溶液的定量结果为53.623mg/mL。<br> 2.划痕实验结果显示:实验组宫颈癌Hela细胞伤口愈合速度慢于对照组。对照组细胞伤口48h基本愈合,72h完全愈合;而实验组细胞伤口72h仍未愈合。<br> 3.Transwell迁移和侵袭实验结果显示:与对照组宫颈癌Hela细胞相比,实验组宫颈癌Hela细胞迁移和侵袭穿过ranswell小室底膜的数量显著减少(P<0.05)。<br> 4.Western blotting结果显示:实验组宫颈癌Hela细胞中E-cadherin蛋白水平的表达显著高于对照组宫颈癌Hela细胞(P<0.01)。实验组和对照组宫颈癌Hela细胞中MMP-2和MMP-9蛋白水平的表达差异均无显著性(P>0.05),但是,与对照组宫颈癌Hela细胞相比,实验组宫颈癌Hela细胞中MMP-2的活性形式显著降低(P<0.01),实验组和对照组宫颈癌Hela细胞中均未见MMP-9活性形式条带。<br> 结论:<br> 1.APS对宫颈癌Hela细胞的迁移和侵袭能力具有显著的抑制作用。<br> 2.E-cadherin表达增加和MMP-2活性降低可能与APS对宫颈癌Hela细胞迁移和侵袭能力的抑制作用有关。
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