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表没食子儿茶素没食子酸酯对深二度烧伤创面愈合的影响

摘要背景:在日常生活中,烧伤难免发生也经常发生,几乎每个人都有被烧伤的经历,在程度上多为Ⅰ度-Ⅱ度。现在认为烧伤创面愈合过程包括炎症、组织重塑的复杂过程。在炎症反应期间,细胞因子发挥着重要的作用,其中白细胞介素-6(IL-6)是烧伤愈合过程中产生的核心细胞因子之一。有报道表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)能抑制促炎症细胞因子TNF-a、IL-1b的表达,但是关于是否对白细胞介素-6有影响在烧伤中还未见详细相关报道。<br>  目的:建立深Ⅱ度烧伤模型,损伤部位给予EGCG处理,通过记录创面愈合大小情况、测定小鼠免疫器官脏器指数及血清溶血素抗体水平、检测组织中IL-6的基因表达和蛋白水平,经过数据整理和分析以及柱状图趋势等探讨表没食子儿茶素-3-没食子酸酯在本实验深二度烧伤小鼠皮肤愈合的过程中所发挥的作用和相应的作用机制。<br>  方法:96只健康小鼠按照科学的方法分为四组,正常对照组、深二度烧伤组、MEBO处理组、0.2mg/g EGCG处理组,正常对照组6只其余三个组为30只。全部小鼠背部脱毛,除正常对照组外均用水浴法形成深二度烧伤创面。四组的处理分别为:正常对照组在经过脱毛后的皮肤除定时给予生理盐水之外不进行任何处理,深二度烧伤组除皮肤烧伤外其余和正常对照组一致,剩余的两组需要用相应的药物处理,按照已查阅文献需要连续给药两周,每天需要定时两次给药。定时测量和记录创面直径(本实验所制作的模型烧伤创面为圆形,每隔2d测量);四组经过处理的小鼠分别于实验处理之时(0d)、处理之后(0.5d、1d、2d、4d和8d)共6个时间段取材,根据所测项目不同取材内容不尽相同。用实时荧光定量PCR和ELISA分别检测各组烧伤皮肤中白细胞介素-6的基因和蛋白水平,使用光学显微镜在经过本实验处理2d、8d、14d时取材制作HE切片观察并记录变化情况,在烧伤处理8d时采集血液对小鼠血清溶血素抗体水平测定和用解剖学方法取出免疫器官胸腺和脾脏并称重完成相应指数的测定。<br>  结果:<br>  1.EGCG明显改善小鼠深Ⅱ°烧伤皮肤创面的愈合时间和效果。<br>  2.EGCG可增强烧伤小鼠免疫功能。<br>  3.EGCG对于IL-6在烧伤初期促进而在愈合后期能有效抑制其过度分泌。<br>  结论:<br>  1.EGCG可促进小鼠皮肤深Ⅱ°烧伤创面的愈合。<br>  2.EGCG可能是通过增强小鼠免疫功能及在烧伤的前期促进IL-6的分泌和在愈合后期能有效抑制IL-6的过度分泌减少炎症反应而发挥促进愈合作用对于小鼠皮肤深Ⅱ°烧伤创面。

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