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摘要免疫防御的起源与演化问题一直是免疫学研究热点之一，作为最低等脊椎动物代表七鳃鳗，一直以来备受关注。因此，基于七鳃鳗免疫防御研究为我们更好的从进化角度来探讨免疫防御的更替过程具有重要意义。本论文利用凝胶层析和液质联用质谱技术从七鳃鳗血清中分离、纯化并鉴定出发挥杀菌功能的LIP(Lamprey immunity protein)，并且对LIP杀菌机理进行研究。<br>　　研究表明七鳃鳗血清具有较强杀菌活性;运用凝胶过滤色谱与杀菌活性相结合的检测方法，逐步缩小血清中具有杀菌活性蛋白质范围;利用液质联用质谱技术对杀菌活性蛋白质进行鉴定为最终解析七鳃鳗血清中杀菌活性蛋白质的氨基酸组成奠定基础。<br>　　根据质谱鉴定结果，首先利用生物信息学方法对ENSPMAP00000004567、ENSPMAP00000005857、ENSPMAP00000001744、ENSPMAP00000005891的理化性质、二级结构、三级结构、序列比对和系统发育做系统分析;其次，利用基因工程手段对Myoglobin5857、Myoglobin1744和4567进行克隆表达及蛋白质纯化;第三，对LIP进行大量表达并纯化;第四，利用纯化后的四种蛋白质并结合抑菌实验检测方法，对这几种蛋白质的杀菌活性进行检测，最终确定LIP为七鳃鳗体内发挥杀菌功能蛋白质之一，Myoglobin5857、Myoglobin1744和4567作为一种“伴侣蛋白质”潜在的参与LIP介导的杀菌过程。第五，利用抗体清除与加回实验进一步证明了LIP为七鳃鳗体内发挥杀菌功能蛋白质。<br>　　LIP杀菌机制进行研究，结果表明首先LIP具有较强的杀菌活性;其次，LIP以多聚体的形式沉积于细菌表面并能够与细菌细胞膜表面的磷脂酰甘油、胆固醇和甘油磷脂和脂多糖结合，同时不能够直接与磷脂酰胆碱和肽聚糖结合;第三，与细菌结合后的LIP能够在短时间内诱使细菌细胞内活性氧水平明显升高;第四，LIP诱使细菌细胞膜发生去极化现象，进而对细菌细胞质膜产生破坏作用;第五，LIP最终导致细菌进入以质壁分离和内容物外泄为特征的细菌细胞坏死状态。<br>　　LIP的发现及杀菌机制的解析，为进一步研究七鳃鳗机体免疫调节及抵御外源病原体入侵的作用机理具有重要意义。同时，LIP的发现为能够更好地从源头上阐述天然免疫与适应性免疫相互作用与进化关系，奠定了坚实的理论基础。