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摘要昆虫肠道共生菌是具有重要生态作用的一类微生物。昆虫种类的多样性与生存环境的复杂性导致了昆虫肠道共生菌的特殊性。昆虫肠道菌是人们发现微生物新物种和具有较好生物活性的代谢产物的重要来源。<br>　　本研究通过活性筛选共得到三株具有生物活性的昆虫肠道共生真菌:MF06、MF08、QTYC51。通过形态学观察和分子生物学鉴定确定了三株真菌的分类地位。通过活性追踪和一系列分离手段对其发酵液的产物进行分离纯化，最终得到8个代谢产物，并对代谢产物进行活性测试。具体研究内容如下:<br>　　1.马蜂肠道真菌MF06和MF08的研究:通过测试11株马蜂肠道真菌发酵液对反枝苋根生长的抑制效果筛选出活性菌株MF06和MF08。通过形态学观察和分子生物学鉴定确定MF06菌株为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）。活性测试表明当供试质量浓度为100μg/mL时，该菌株发酵液的乙酸乙酯粗提取物对反枝苋根生长的抑制率大于68％。通过硅胶柱层析法、薄层层析法、葡聚糖凝胶柱层析法对乙酸乙酯粗提物进行分离、纯化，得到代谢产物1，经过结构鉴定为镰刀菌酸与9，10-脱氢镰刀菌酸以1∶1比例形成的混合物。活性测试表明代谢产物1对反枝苋根生长具有很强的抑制作用，抑制活性的IC50值为(0.51±0.18)μg/mL，与阳性对照药2，4-二氯苯氧乙酸的活性(IC50值为(0.30±0.14)μg/mL）相当。<br>　　通过形态学观察和分子生物学鉴定确定菌株MF08为新月弯孢菌（Curvularia lunata）。活性测试表明当供试浓度为100μg/mL时，菌株MF08乙酸乙酯粗提物对反枝苋和稗草根生长的抑制效果最佳，抑制率分别为77％和88％(阳性对照药2，4-二氯苯氧乙酸对反枝苋和稗草根生长的抑制率分别为90％和95％)。通过硅胶柱层析法、薄层层析法、葡聚糖凝胶柱层析法对乙酸乙酯粗提物进行分离、纯化，共得到代谢产物2和3。通过核磁共振和质谱分析，确定代谢产物2为2-乙酰基-3，5-二羟基苯乙酸乙酯(ethyl2-acetyl-3，5-dihydroxyphenylac-etate)，代谢产物3为2-乙酰基3，5-二羟基苯乙酸甲酯(methyl2-acetyl-3，5-dihy- droxyphenylacetate)。对两种代谢产物进行除草活性测试，遗憾的是二者均无除草活性。<br>　　2.蜻蜓幼虫肠道真菌QTYC51的研究:通过除草活性测试发现菌株QTYC51发酵液对反枝苋和稗草根生长有一定的抑制效果。经形态学观察和分子生物学鉴定，确定该真菌为拟盾壳霉属真菌（Paraconiothyrium pinophilum）。当供试浓度为100μg/mL时，乙酸乙酯相粗提物对反枝苋和稗草根生长的抑制率相对较好，分别为15％和49％。通过一系列分离操作，从发酵液的乙酸乙酯粗提物中分离得到了代谢产物4-8。采用波谱分析，确定代谢产物分别为1，8-二羟基蒽醌（1，8-dihydroxy anthraquinone，4），1-羟基-10甲氧基-二苯并[b，e]氧杂卓-6，11-二酮(1-hydroxy-10-methoxy-dibenz[b，e]oxepin-6，11-dione，5)，2，8-二羟基-9-氧杂蒽-9H-1-甲酸甲酯(hydroxyvertixanthone，6)，(1R，2R)-1，2，8-三羟基-9-氧杂蒽-2，9-二氢-1H-1-甲酸甲酯(microdiplodianone，7)，1，3，6，8-四羟基蒽醌（1，3，6，8-tetrahy-droxyanthraquinone，8）。对物种代谢产物进行除草活性测试、抗细菌活性测试和抗植物致病真菌活性测试，结果如下。(1)除草活性测试:经测试发现5种代谢产物均有不同程度的除草活性，其中代谢产物7对反枝苋和稗草的抑制效果最佳，IC50值分别为(10.23±2.70)μg/mL和(3.21±1.40)μg/mL(阳性对照药2，4-二氯苯氧乙酸对反枝苋和稗草根生长的抑制率分别为(0.30±0.14)μg/mL、(0.0052±0.0036)μg/mL))。(2)抗细菌活性测试:代谢产物4和6对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌均有一定的抑制效果，其中代谢产物4对枯草芽孢杆菌的MIC值为25μg/mL，代谢产物7对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的MIC值均为12.5μg/mL（阳性对照药硫酸庆大霉素对这两种细菌的MIC值均为6.25μg/mL）。(3)抗植物致病真菌活性测试:代谢产物5-7对水稻稻瘟病菌和杨树溃疡病菌有极微弱的抑制活性。<br>　　根据以上研究结果和现阶段人们对昆虫肠道共生菌的探究可以预知，昆虫肠道共生菌作为研究较少的一类微生物，很有可能是活性天然产物的重要来源，此类微生物及其代谢产物值得人们的广泛关注和深入研究。