摘要目的:检测IKKε在上皮性卵巢癌组织和细胞中的表达及其抑制IKKε表达后对卵巢癌细胞增殖、凋亡能力的影响,探讨IKKε在卵巢癌中的作用和临床意义。<br> 方法:(1)选取2006年01月至2013年04月期间就诊于大连医科大学附属第一医院妇科经手术治疗且经病理检查证实的上皮性卵巢癌患者118例,另取同期因子宫肌瘤行子宫及卵巢切除术、且术后经病理检查证实的正常卵巢组织20例作为对照组,应用免疫组化SP法检测IKKε蛋白在两组卵巢组织中的表达,并分析其与上皮性卵巢癌患者临床病理因素之间的关系;(2)体外培养上皮性卵巢癌细胞OV2008(子宫内膜样癌、顺铂敏感细胞株)、C13(子宫内膜样癌、顺铂耐药细胞株)、A2780S(未分化癌、顺铂敏感细胞株)、A2780CP(未分化癌、顺铂耐药细胞株)、SKOV3(人卵巢腺癌细胞株),应用蛋白印迹法(western blot)分别检测五种细胞中IKKε蛋白的表达水平,检测IKKε抑制剂(0.1μM、0.5μM)作用48h后对A2780S、A2780CP和C13细胞中IKKε蛋白表达的影响;(3) MTT比色法检测不同浓度IKKε抑制剂(0-25μM)作用48h后对五种细胞增殖能力的影响;(4)流式细胞术检测IKKε抑制剂(0.1μM、0.5μm)作用48h后对五种细胞凋亡率的影响。<br> 结果:(1)IKKε在上皮性卵巢癌组织中呈高表达,表达率为66.10%(78/118),而在正常卵巢组织的表达率为35.00%(7/20),两者相比较差异有统计学意义(P<0.05)。上皮性卵巢癌组织中IKKε蛋白的表达强度与FIGO分期、组织病理学分级、术前血清CA125水平、肿瘤的分布和生存时间均明显相关(P<0.05),而与年龄、组织病理学类型、发病模式和肿瘤大小均无明显相关性(P>0.05);(2) IKKε蛋白在OV2008、C13、A2780S、A2780CP和SKOV3细胞中均有不同程度的表达,IKKε抑制剂(0.1μM、0.5μM)分别作用A2780S、A2780CP和C13细胞48h后,IKKε蛋白表达水平均明显降低,且呈浓度依赖性;(3)不同浓度IKKε抑制剂对卵巢癌细胞均有不同程度的增殖抑制作用,且抑制作用具有浓度依赖性,随抑制剂浓度的增加,对细胞的增殖抑制作用逐渐增强,各浓度组细胞生存率均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);(4) IKKε抑制剂(0.1μM、0μμM)分别作用OV2008、C13、A2780S、A2780CP和SKOV3细胞48h后,可诱导细胞发生凋亡并呈浓度依赖性,凋亡倍数均随抑制剂浓度的增加而增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。<br> 结论:IKKε在上皮性卵巢癌组织和细胞中均有表达,随着病变的进展,IKKε蛋白的表达水平增高,使用IKKε抑制剂下调IKKε后,可抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞发生凋亡,且随着药物浓度的增加,增殖抑制作用增强,凋亡倍数增加。由此推测,IKKε可能参与卵巢癌的发生和发展,临床上可能成为卵巢癌分子治疗新的靶基因。
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