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Sox9介导Wnt/β-catenin信号通路影响皮肤鳞癌细胞增殖的机制

摘要目的:<br>  探讨β-连环蛋白(β-catenin)和Sox9(sex determining region Y-box9)对鳞状细胞癌细胞增殖的影响及作用机制。<br>  方法:<br>  1. 人皮肤鳞状细胞癌细胞系SCC12细胞,传代培养用于实验研究。合成腺病毒载体,实验组为腺病毒介导的miRNA转染组,对照组为空载组。转染后测定转染效率。<br>  2. 通过免疫印迹法(Western Blotting)检测腺病毒转染后β-catenin的表达。集落形成分析(Colony Forming Assay)观察腺病毒介导的miRNA沉默β-catenin后SCC12细胞的增殖情况。<br>  3. 免疫印迹法检测腺病毒介导的miRNA沉默β-catemn后Sox9的表达情况。<br>  4. 集落形成分析观察腺病毒介导的miRNA沉默Sox9后SCC12细胞的增殖情况。<br>  5. 腺病毒介导的miRNA沉默β-catenin后应用腺病毒介导的Sox9过表达Sox9,通过集落形成分析探讨在鳞状细胞癌中β-catenin和Sox9的关系。<br>  结果:<br>  1. 沉默β-catenin基因的SCC12细胞增殖明显减少,与Scr对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。<br>  2. SCC12细胞中,应用腺病毒介导的miRNA沉默β-catenin,Sox9基因的表达明显减少。<br>  3. 转染Ad/miR-Sox9沉默Sox9基因的表达,明显抑制SCC12细胞的增殖,与Scr对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。<br>  4. 沉默β-catenin基因的SCC12细胞中同时过表达Sox9基因,SCC12细胞的增殖部分恢复,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。<br>  结论:<br>  应用Ad/miR-β-catenin转染皮肤鳞状细胞癌细胞SCC12后,SCC12细胞的增殖受到抑制。我们的研究结果表明,Sox9基因是被β-catenin调节的转录因子,并且Sox9基因促进SCC12细胞的增殖。

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