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摘要动物胆汁药用在中国已有3000多年的历史，历代本草书籍中收录记载的胆汁药用动物有30多种。动物胆汁中的药性成分主要是胆汁酸，已被广泛应用于医药等领域。尤其是熊胆汁中的熊去氧胆酸(UDCA)和牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)，能有效溶解胆结石，且为熊胆汁的主要药用成分。最近一些年来，由于活熊取胆有悖于动物福利理念，养熊业正遭到公众的抵制，但人们对熊胆的需求并无缩减。因此，寻找熊胆药品的替代品已成为学术界和中国社会的迫切需要。<br>　　动物胆汁酸的研究虽然已经很深入，但人们始终没有找到含有UDCA或TUDCA的理想对象。牛胆、猪胆、羊胆、鸡胆、蛇胆、鱼胆等虽然也有类似物质，但均与熊胆成分药性有一定差距，而无法成为替代。究其原因，可能是这些动物的食性、分类或生理特征都与熊类的相差甚远。熊类虽然是杂食动物，但仍然偏向于动物性食物，其胆汁物质的生成与作用必然有别于纯草食性动物（如:猪、牛、羊）的胆汁物质。<br>　　蓝狐(Alopex lagopus)是北极狐在人工圈养下的经济野生动物，食性以动物性饲料（如:鱼类）为主，也喂食少量谷物，与养殖熊的饲料相似。人类养殖蓝狐已有100多年的历史，但利用目标主要是其毛皮。中国目前每年生产蓝狐皮约1000万张，取皮后的尸体和内脏多被废弃，意味着每年要浪费1000多万个胆囊。蓝狐胆汁中含有什么物质？是否具有类似熊胆汁成分的高药性物质？至今仍无人开展详细的研究与分析。在这样的大背景下，探索蓝狐的胆汁药性不仅具有很强的理论意义，而且具有极大的生产实践和社会意义，能为寻找熊胆替代品提供新的思路与途径，这也是本研究的主要原因。<br>　　动物胆汁酸有许多类别，而本文主要研究的成分有两种:一是游离型的UDCA，另一是结合型的TUDCA。这两种物质都是熊胆汁中的有效药用成分，对于治疗肝损伤具有明显的疗效，也是人们追逐熊胆的目地。为了寻找这两类物质，本文同时使用了两种有效的方法，即:薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)。前者能定性鉴别UDCA，后者可定量TUDCA。为了探研蓝狐胆汁物质的药用价值，本文采用了三种肝损伤模型，即:四氯化碳(CCL4)肝损伤模型、D-半乳糖盐酸盐(D-Galn)肝损伤模型及酒精肝损伤模型。最后通过二甲苯抗炎模型及抗菌实验，证明蓝狐胆汁具有的抗炎、抑菌能力。<br>　　通过上述研究设计，本论文主要获得了以下研究结果:<br>　　1.运用直观和显微鉴定方法，对30只饲养蓝狐的新鲜胆、干燥胆及胆汁粉的物理特征进行了观察和描述。发现，新鲜的蓝狐胆每个平均重约平均重为3.70±0.25g;每个胆囊平均含胆汁2.15±0.35g。晾干后的胆囊平均重1.50±0.20g;干燥后的胆汁粉为黄棕色，有光泽，易碎，每个胆囊平均含干胆汁粉约0.82±0.30g。胆粉结晶为不规则形，无偏光，有纹理，与熊胆粉镜下结构相似。<br>　　2.采用TLC法，对蓝狐胆汁粉中的成分进行了定性分析。发现，蓝狐胆汁中存在三类物质，其中两类与熊胆汁中的相同，并可鉴定出其中一类为UDCA。熊胆汁中也存在三类物质。蓝狐胆汁成分与熊胆汁成分的相似度为50％。<br>　　3.利用HPLC法，对蓝狐胆汁粉中的成分进行了定性与定量分析。发现，蓝狐胆汁与熊胆汁有10类共同物质，其中一类可鉴定为TUDCA。此外，蓝狐胆汁共有13类物质，熊胆汁共有约20类物质。进一步，经计算得到每250.00mg蓝狐胆汁的干燥粉末中含有33.41mg的牛磺熊去氧胆酸钠，而每250.00mg引流熊胆的干燥粉末中含有牛磺熊去氧胆酸钠59.88mg，运用UPLC-Q-TOF/MS（高分辨飞行时间质谱法）同样检测到UDCA及TUDCA。<br>　　4.借鉴经典的CCL4、 D-Galn及酒精性肝损伤造模方法，各对五组（其中一组为非损伤的空白组）小鼠进行了肝损伤实验。发现，四组被CCL4或D-Galn或酒精损伤了肝以后的小鼠，血液中AST（谷草转氨酶）、ALT（谷丙转氨酶）、T-CHO（总胆固醇）、以及肝组织MDA（丙二醛）浓度都明显增高，模型组与空白组差异明显(P＜0.05)。<br>　　5.三个模型实验均发现，无论是高、低剂量，投喂蓝狐胆汁粉的小鼠AST、ALT、T-CHO、MDA四个指标均出现了明显下降(P＜0.05)，说明蓝狐胆汁有效降低了这四个指标的浓度。这三个组与空白组对比时，CCL4肝损伤模型实验中MDA含量无显著差异，D-Galn肝损伤模型实验中高剂量组的MDA含量无显著差异，说明蓝狐胆至少能使这种物质恢复正常。<br>　　6.三个药物组（护肝片、高、低剂量蓝狐胆汁）之间的指标绝对数值存在差异，反映其疗效差别为:阳性组＞高剂量组＞低剂量组。组织切片之间的形态差异揭示了小鼠肝损伤后的组织病变，也证明了三个药物组之间的疗效差别。不过，在D-Galn肝损伤模型实验中，使MDA恢复正常时，高剂量的蓝狐胆汁似乎比护肝片更有疗效。<br>　　7.二甲苯经典抗炎模型揭示，尤以蓝狐胆汁高剂量组有较好的抗炎效果。<br>　　8.钢管体外抑菌实验方法，发现:三个不同剂量蓝狐胆汁，对金黄葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、变形杆菌(Proteus sp.)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)均有明显的抑制作用，并随使用剂量的加大，抑菌效果随之增强。蓝狐胆汁对大肠杆菌的抑制作用最强，其次是金黄色葡萄球菌，再次是变形杆菌。对比之下，对枯草芽孢杆菌的抑制效果较差。<br>　　本文的创新性点:使用TLC和HPLC法对蓝狐胆汁进行分析，为进一步研究提供了方法参考;发现蓝狐胆汁中存在UDCA和TUDCA，为熊胆汁药品替代提供了新的思路;对蓝狐胆汁酸的药性进行分析，证明了蓝狐胆汁护肝、抗炎抑菌作用，为空白的蓝狐胆开发提供研究基础与理论参考。