检索历史 清除

摘要研究目的:<br>　　研究及证实慈济化癌保生方(Ciji Hua'ai Baosheng Formula，CHBF)对肝癌H22荷瘤小鼠化疗后肿瘤微血管的影响。通过观察小鼠一般生存状况、测量体重、瘤重和计算抑瘤率，观察肿瘤微血管密度(microvessel density，MVD)以及对血清与肿瘤组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、VEGF受体-含激酶插入结构域的受体(kinase insert domain-containing receptor，KDR)和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）含量的影响。明确慈济化癌保生方影响肿瘤微血管生成的作用机制，为慈济化癌保生方在临床的应用研究提供科学依据。<br>　　研究方法:<br>　　以SPF(specific pathogen-free)级Kunming种小鼠60只，4周龄，18-22g，以传代H22肝癌细胞悬液，调整为2×107/ml，接种子小鼠右前腋部皮下，形成移植瘤后，予以环磷酰胺(cytoxan，CTX)200mg/kg，浓度10mg/ml，一次性腹腔注射，建立肝癌H22荷瘤小鼠化疗后模型。随机分为模型组、环磷酰胺(CTX)组、CHBF高剂量(117g/kg)组、CHBF中剂量(58.5g/kg)组、CHBF低剂量(29.25g/kg)组，共5组，每组12只，给予正常饲料、饮水，除模型组以生理盐水灌胃干预，其他组分别予以不同药物进行干预。期间观察小鼠一般生存状态，连续给药10天后，称重，眼球取血，处死剥离肿瘤，称取瘤重，计算抑瘤率;3000r/min离心15min分离出血清。苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色法瘤组织切片，光镜下观察肿瘤组织病理结构改变;采用酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)法检测外周血清及肿瘤组织混悬液VEGF、KDR、bFGF含量;免疫组化法检测CD34标记的肿瘤微血管密度(MVD)值;免疫组化法检测VEGF、bFGF抗体标记的肿瘤VEGF、bFGF的表达;采用蛋白印迹法(western blot，WB)检测肿瘤VEGF、bFGF蛋白表达情况。<br>　　研究结果:<br>　　1.CHBF能改善化疗后小鼠一般生存质量。CHBF各组体重与模型组相比，无明显差异，CTX组较模型组减轻;CHBF各组瘤重均低于模型组，但抑瘤率均低于CTX组;<br>　　2.HE染色后，模型组巨核细胞分布密集、杂乱，其余各组均不同程度好于模型组;CTX组及CHBF中高剂量组MVD显著低于模型组，差异具有统计学意义，其中CHBF高剂量组MVD显著低于CTX组;<br>　　3.采用ELISA、免疫组化、WB法检测外周血清及肿瘤组织VEGF含量，CHBF高剂量组结果均显著好于模型组，CHBF高剂量组部分结果好于CTX组;外周血清及肿瘤组织KDR含量，CHBF各剂量组结果均好于模型组;外周血清及肿瘤组织bFGF含量，CHBF高剂量组结果均显著好于模型组，CHBF高剂量组部分结果好于CTX组。<br>　　结论:<br>　　1.慈济化癌保生方可以抑制化疗后肝癌H22荷瘤小鼠的血管生成;<br>　　2.慈济化癌保生方可以通过抑制荷瘤小鼠肝癌组织释放的因子如VEGF、bFGF及VEGF的受体KDR来达到抑制血管生成的作用。