换一批
换一批摘要将生长两周的海边香豌豆(Lathyrus maritimus (L.) Bigel)无菌苗下胚轴切成0.5cm左右的片段,培养于含有1mg/L 2,4-D,0.5mg/L BA和0.5%NaCl的MS培养基中.4周后将诱导出的胚性愈伤组织转入含有适当浓度2,4-D的MS培养基上,又4周后可得到大量球形胚和心形胚以及极少量鱼雷胚和子叶胚.诱导体细胞胚适合的2,4-D浓度为0.5mg/L.较高浓度的2,4-D能阻止体细胞胚越过球形期发育,但有利于体细胞胚产率的提高.NaCl对于胚性愈伤组织的诱导十分关键.体细胞胚发生的频率随胚性愈伤组织开始的几次继代降低,以后趋于稳定.虽然最终仅获得了极少量子叶胚而没有实现由体细胞胚发生途径再生植侏,但以在含有10mg/L BA的MS培养基上萌发并生长的海边香豌豆的无菌苗的子叶外植体切块为材料,将其仍培养在含有10mg/L BA的MS培养基上,三周后诱导出愈伤组织和少量的不定芽.将诱导出不定芽的愈伤组织块转入含有0.5mg/L BA的MS培养基上,一周后,不定芽长高成苗,苗基部有根长出.以海边香豌豆胚性愈伤组织为材料进行原生质体培养获得了细胞团.修饰的MS培养基(MS+KM8p附加物)作为原生质体培养的基本培养基有利于原生质体的分裂.
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