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摘要乳腺癌是严重危害女性身心健康的恶性肿瘤，在我国，乳腺癌的发病率和死亡率都在逐年上升，并且呈现有年轻化的趋势。近年来虽然在乳腺癌的诊断、治疗水平方面有了很大提高，但由于乳腺癌本身的异质性，在治疗乳腺癌过程中仍然遇到了一些困难。三阴性乳腺癌(TNBC)是雌激素受体(ERα)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体(Her2)均为阴性的乳腺癌亚型，在乳腺癌患者中大约占10-15％，患者预后极差，且生存时间较短，对内分泌治疗不敏感，因而目前尚缺乏有效的靶向治疗手段。<br>　　KLF5是一个重要的转录因子，其异常表达与结直肠癌、乳腺癌、膀胱癌和前列腺癌等的发生、发展密切相关。我们前期的研究发现，转录因子KLF5在TNBC中高表达，并且可以促进TNBC细胞的增殖、生长、迁移以及维持乳腺肿瘤干细胞干性。KLF5的高表达，预示着乳腺癌患者的预后较差，是TNBC有效的潜在治疗靶点。文献报道KLF5在转录水平受到RARα、NFκB、p-catenin、EGR1等的调节，但是其在三阴性乳腺癌的具体转录调控机制仍需要进一步探索。细胞命运决定因子DACH1是一个与果蝇视网膜及四肢发育相关的基因，并且在很多癌症中包括乳腺癌中表现出异常低表达，长期以来扮演着抑癌基因的角色，但DACH1在三阴性乳腺癌中的功能和具体机制目前还没有被详细报道。<br>　　我们研究发现，细胞命运决定因子DACH1在TNBC细胞中可能部分通过抑制KLF5的功能，抑制细胞的增殖、生存和侵袭。DACH1的抑癌功能可能部分通过抑制转录因子YB-1，从而下调KLF5及其下游靶基因的表达。我们得出一个结论:DACH1可能通过YB-1抑制KLF5及其下游靶基因的表达，从而抑制三阴性乳腺癌。<br>　　研究中我们首先明确了DACH1和YB-1在体内、体外调节TNBC的功能。我们在乳腺上皮细胞系以及三阴性乳腺癌细胞系中检测了DACH1、YB-1以及KLF5的表达情况，发现DACH1与YB-1/KLF5在TNBC细胞系中的蛋白表达水平正好相反DACH1在TNBC中低表达，而YB-1和KLF5在TNBC均呈现高表达。接下来，我们在两株三阴性乳腺癌细胞系HCC1937和HCC1806中过表达DACH1，发现DACH1可以抑制的细胞增殖、DNA合成以及侵袭，并促进细胞凋亡。我们发现DACH1抑制KLF5表达，为了解析DACH1通过何种分子机制抑制KLF5，我们在 HEK293细胞中过量表达DACH1以及YB1，观察到内源KLF5会被YB-1上升，DACH1则抑制YB-1这种功能。此外，我们单独在HCC1937和HCC1806中敲低DACH1以及YB-1，发现敲低YB-1导致内源的KLF5下降，敲低DACH1引起KLF5表达水平上升。<br>　　Luciferase报告基因实验表明，YB-1可以促进KLF5启动子活性，而DACH1可以降低KLF5启动子的活性。Oligo pull-down实验证明，YB-1可以直接结合到KLF5启动子区域的CCAAT序列。这些结果组合在一起初步说明DACH1降低KLF5表达是在转录水平，DACH1可能通过抑制YB-1调控KLF5表达。<br>　　综上所述，这些研究表明了，DACH1、YB-1和KLF5在三阴性乳腺癌中异常表达，DACH1降低KLF5的表达发生在转录水平，并且可能部分通过YB-1介导，从而抑制KLF5转录，抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖、生存和侵袭。DACH1、YB-1和KLF5组合在一起可能是潜在的三阴性乳腺癌预后标志物或治疗靶标。本研究可为将来TNBC的临床治疗提供新的策略。