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摘要目的:通过细胞实验探索20(S)-人参皂苷Rg3(Rg3)对肝癌细胞自噬介导的索拉非尼药物敏感性的影响，并研究其机制，为临床联合药物治疗肝癌提供理论参考。<br>　　方法:以人肝癌细胞株Hep3B为观察对象，分别接受Rg3、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)索拉非尼、Rg3+索拉非尼和3-MA+索拉非尼处理，采用MTT法检测Hep3B细胞对Rg3、索拉非尼及3-MA的敏感性;CCK-8法检测Rg3、3-MA分别联合不同浓度索拉非尼后对Hep3B细胞的增殖抑制作用，q值判断联合用药效果;细胞克隆形成实验检测各组药物对Hep3B细胞的增殖抑制率;利用倒置荧光显微镜（丫啶橙染色）及透射电镜观察各组细胞内自噬体的数量;LC3 Conversion实验及LC3 Turnover实验检测Rg3和索拉非尼对Hep3B细胞自噬的影响;Western blotting检测Rg3和索拉非尼对自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ、p62水平的影响。<br>　　结果:1.MTT结果显示，Rg3、索拉非尼及3-MA对肝癌细胞株Hep3B的增殖抑制呈明显的“量效关系”和“时效关系”。2.CCK-8结果显示:低、中、高浓度索拉非尼联合Rg3前后的抑制率均有统计学差异(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.05)。低、中浓度索拉非尼联合3-MA前后亦有显著差异(P＜0.01)，但高浓度与之联合前后差异不明显(P＞0.05)。q值计算结果显示:低、中浓度索拉非尼联合Rg3及3-MA后表现为协同作用;高浓度与其联合后表现均为相加作用。3.细胞克隆形成实验结果显示，与对照组相比，索拉非尼单药增殖抑制率明显高于对照组(P＜0.01)，Rg3和3-MA抑制不明显(P＞0.05)，索拉非尼联合Rg3或3-MA增殖抑制率均高于索拉非尼单药(P＜0.05)。4.倒置荧光显微镜和透射电镜显示，与对照组相比，Rg3组、素拉非尼组细胞自噬体数量明显增加，但3-MA组增加不明显，索拉非尼联合3-MA后自噬体数量明显减少，但联合Rg3后减少不显著。5.LC3 Conversion实验结果显示:随着药物作用时间(0h、8h、16h、24h)的延长，Rg3及索拉非尼均使Hep3B细胞株LC3-Ⅱ蛋白水平不断升高;LC3 Turnover实验结果显示:索拉非尼联合氯喹(CQ)作用24h后，LC3-Ⅱ蛋白水平明显升高(P＜0.01)，而Rg3联合CQ前后LC3-Ⅱ水平无明显差异(P＞0.05)。6.Western-blotting结果显示:与对照组相比，Rg3、索拉非尼均可使Beclin1蛋白表达升高(P＜0.01)，而3-MA对Beclin1表达无影响(P＞0.05)，索拉非尼联合3-MA后Beclin1水平明显降低（P＜0.01），而联合Rg3后下降不明显(P＞0.5)。Rg3、3-MA及索拉非尼均可使LC3-Ⅱ水平升高(P＜0.01; P＜0.05; P＜0.01)，索拉非尼联合Rg3后LC3-Ⅱ水平高于索拉非尼单药(P＜0.01)，而索拉非尼联合3-MA前后LC3-Ⅱ水平无明显变化(P＞0.05)。3-MA、索拉非尼组p62蛋白水平明显低于对照组(P＜0.01;P＜0.05)，而Rg3对其水平无明显影响(P＞0.05)，索拉非尼联合Rg3后p62水平明显升高(P＜0.01)，联合3-MA后水平明显降低(P＜0.01)。<br>　　结论:1.索拉非尼可通过增加Beclin1的表达诱导肝癌细胞自噬，从而导致其药物敏感性下降。2.低浓度的Rg3对肝癌细胞的增殖抑制不明显，但可增加索拉非尼的敏感性，其机制是通过抑制肝癌细胞自噬降解活性来实现的，值得进一步研究。3.本研究为索拉非尼联合中药治疗肝癌提供了理论依据，亦为临床中西医结合治疗肝癌提供更优化的方案，进一步提高肝癌的疗效提供了实验依据。