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中国人群中ZMIZ1、GDNF基因多态性与2型糖尿病及代谢指标的相关性研究

摘要2型糖尿病是一种多基因遗传病,遗传因素对2型糖尿病的发病产生重要影响。随着DNA测序技术不断发展,在全世界范围不断发现新的2型糖尿病易感基因位点。基于欧洲人群和日本人群的研究发现ZMIZ1基因多态性位点rs12571751与2型糖尿病的发病风险相关,然而未见文献报道在中国人群中对该基因位点与2型糖尿病的相关性进行研究。GDNF最初作为一种神经营养因子被发现,然而近年来研究者们还发现该蛋白对胰岛的发育,胰岛β细胞的数量、增殖和凋亡,血糖稳态和葡萄糖耐量等都存在影响,提示GDNF基因可能参与2型糖尿病的发生发展。在GDNF的众多SNP位点中,rs884344位点被发现与抑郁发病相关,提示该位点遗传作用较明显。<br>  目的:<br>  采用Taqman探针进行SNP等位基因分型和统计学分析等方法,在中国人群中探究ZMIZ1基因rs12571751位点和GDNF基因rs884344位点的基因多态性与2型糖尿病及各项代谢指标的相关性。<br>  具体工作:<br>  1、根据研究对象的入组和排除标准,在江苏省南京市招募本研究的受试者,共870例。根据糖尿病诊断标准,将受试者分为对照组、糖尿病前期组和2型糖尿病组。采集受试者一般临床资料并进行人体学测量和临床生化指标测定。人体学测量包括身高、体重、腰围和臀围,用于计算BMI和腰臀比。临床生化指标包括空腹血糖、餐后血糖和糖化血红蛋白等与葡萄糖代谢相关的指标。该部分内容为课题组前期已完成工作。<br>  2、采用血液基因组DNA提取试剂盒对受试者的血液样本进行DNA提取,并通过微量分光光度计测试DNA的浓度和纯度,OD260/OD280值的结果显示,DNA浓度和纯度较都较好。采用Taqman探针法,利用荧光实时定量PCR仪对DNA样本进行rs12571751位点和rs884344位点的SNP等位基因分型。SNP等位基因分型结果图显示,代表不同基因型的点呈现分散的三簇排列,表明Taqman探针的特异性较好,SNP等位基因分型结果准确可靠。<br>  3、对ZMIZ1基因多态性位点rs12571751与2型糖尿病、各项代谢指标及肥胖的相关性进行统计学分析。首先统计纳入该部分研究的受试者的一般临床资料。然后进行哈温遗传平衡检验,结果显示本研究的样本具有较好的群体代表性。利用卡方检验的方法研究rs12571751位点等位基因频率和基因型分布与2型糖尿病的相关性,结果并未发现相关性(P>0.05)。调整性别、年龄和BMI作为协变量,进行多元logistic回归,结果也显示,该位点基因型分布与2型糖尿病无相关性(P=0.517,P=0.755)。利用方差分析的方法研究该位点基因型分布与各项代谢指标的相关性,结果显示,不同基因型间BMI、腰臀比、空腹血糖、餐后血糖和糖化血红蛋水平无显著性差异(P>0.05)。多元线性回归的结果也显示,该位点基因型分布与BMI(P=0.927)、腰臀比(P=0.104)、空腹血糖(P=0.858)、餐后血糖(P=0.953)和糖化血红蛋白(P=0.981)无相关性。最后,进行了该位点与肥胖的相关性研究,结果也未发现该位点与肥胖相关(P>0.05)。<br>  4、采用同样的统计学方法研究GDNF基因多态性位点rs884344与2型糖尿病、各项代谢指标及肥胖的相关性。哈温遗传平衡检验的结果表明该位点的样本具有较好的群体代表性。卡方检验的结果显示,rs884344位点等位基因频率(P=0.484)和基因型分布(P=0.664)与2型糖尿病的发病无相关性。调整性别、年龄和BMI的多元logistic回归结果也表明,该位点基因型分布与2型糖尿病的发病无相关性(P=0.603,P=0.827)。方差分析的结果显示,不同基因型间BMI、腰臀比、空腹血糖、餐后血糖和糖化血红蛋白水平无显著性差异(P>0.05)。多元线性回归的结果也表明,该位点基因型分布与BMI(P=0.601)、腰臀比(P=0.412)、空腹血糖(P=0.115)、餐后血糖(P=0.379)和糖化血红蛋白(P=0.239)无相关性。卡方检验和多元logistic回归的结果显示,该位点基因多态性与肥胖也不存在相关性(P>0.05)。<br>  综上所述,本论文认为在中国人群中ZMIZ1基因rs12571751位点和GDNF基因rs884344位点的基因多态性与2型糖尿病不存在相关性。这两个位点与BMI、腰臀比、空腹血糖、餐后血糖和糖化血红蛋等代谢指标及肥胖也无相关性。

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