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摘要目的:<br>　　制备符合实验要求具有EGFR靶向性的纳米金颗粒，用于体外放射治疗研究，研究C225-GNPs联合兆伏级X射线对EGFR高表达人肝癌SMMC-7721细胞的体外放射增敏效应，并从细胞周期改变、细胞凋亡、内质网应激途径探讨C225-GNPs的放射增敏机制。<br>　　方法:<br>　　首先运用柠檬酸还原法合成尺径20nm纳米金，运用静电吸附形成Au-S、Au-N合成C225-金纳米共轭物。采用透射电镜、紫外分光光度仪、动态光散射仪以及酶联免疫吸附法对两种纳米材料进行表征;GNPs、C225-GNPs与SMMC-7721细胞共培养24h后，电镜下观察两组细胞对纳米颗粒的摄取，将EGFR高表达SMMC-7721细胞进行体外培养，利用CCK-8法检测不同浓度下GNPs、C225-GNPs对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用，绘制细胞增殖抑制曲线，计算IC50值。选用1/5IC50浓度的GNPs、C225-GNPs与细胞共培养24h后进行6MVX线照射(照射剂量为:0、0.5、1、2、4、6Gy)，采用平板细胞克隆形成实验研究GNPs、C225-GNPs的放射增敏效应，利用单击多靶模型绘制细胞存活曲线，求出D0、Dq等相关放射生物学参数，计算放射增敏比(SER)。流式细胞仪检测各组细胞凋亡、细胞周期改变。蛋白印迹法检测相关凋亡蛋白及内质网应激相关蛋白。<br>　　结果:<br>　　透射电镜显示实验合成的C225-GNPs大小均匀，分散性良好。探针表面蛋白经磷钨酸染色，粒子表面可见一层薄薄的白色光圈。偶联抗体并使用蛋白封闭多余位点后，颗粒粒径一定程度增大，提示蛋白包被成功。平均单个纳米金颗粒表面偶联94.65个抗体，C225-GNPs性质较稳定。电镜结果显示C225-GNPs较GNPs在EGFR高表达SMMC-7721细胞中有更多沉积，且在内质网沉积明显。利用不同浓度GNPs、C225-GNPs处理细胞后，C225-GNPs对细胞的增殖抑制作用较明显，IC50分别为6.14μg/ml、4.11μg/ml，通过平板细胞克隆形成实验计算放射增敏比(D0/D0)分别为1.54、1.66，放射增敏比(Dq/Dq)分别为1.38、1.85。流式细胞仪检测提示C225-GNPs联合X射线较GNPs组，细胞凋亡率明显增加;C225-GNPs联合X射线与GNPs组相比，G2/M期细胞比例增加(P＜0.05)。蛋白印迹法检测结果提示C225-GNPs组较空白对照组，C225-GNPs联合X射线组较单纯照射组，细胞Bcl-2蛋白表达下降，Bax、Caspase-3蛋白表达均有增加(P＜0.05)。GRP78、IREα均增加，PERK则呈下降趋势(P＜0.05)。<br>　　结论:<br>　　C225-GNPs联合6MV X线较GNPs对EGFR高表达SMMC-7721细胞有更强的放射增敏作用，其机制可能为增加了射线对细胞的凋亡和细胞周期同步化，可能与激活内质网应激途径促进凋亡相关。