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摘要本文通过以下几个部分展开论述：<br>　　第一部分 脂联素对脓毒症小鼠炎性反应及自噬水平的影响<br>　　目的:<br>　　探讨脂联素对脓毒症小鼠炎性反应及自噬水平的影响及其可能机制。<br>　　方法:<br>　　清洁级健康雄性C57BL/6小鼠32只，体重20～25 g，2月龄，采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组（C组）、脓毒症模型组(CLP组)、外源性脂联素组(APN组)和脓毒症模型+外源性脂联素组（CLP/APN组）。CLP组及CLP/APN组采用盲肠结扎穿孔法构建脓毒症动物模型;CLP/APN组于CLP术前12h经腹腔注射基因重组脂联素6 mg/kg; APN组于CLP/APN组相同时刻经腹腔注射基因重组脂联素6 mg/kg。密切观察小鼠直至造模后24h时，麻醉后腹主动脉取血，断头法处死小鼠并留取肝、肺组织标本。HE染色切片观察小鼠肝、肺组织损伤;Elisa法检测小鼠血清IL-1β及IL-6水平;免疫荧光染色观察小鼠肝、肺组织LC3B含量。<br>　　结果:<br>　　1.与C组比较，CLP组和CLP/APN组小鼠肝、肺组织损伤明显加重;小鼠血清IL-1β及IL-6水平增高(P＜0.05);免疫荧光染色示LC3B颗粒面积增加(P＜0.05)。<br>　　2.与CLP组比较，CLP/APN组小鼠肝、肺组织损伤明显得到改善;小鼠血清IL-Iβ及IL-6水平降低(P＜0.05);免疫荧光染色示LC3B颗粒面积进一步增加(P＜0.05)。<br>　　3.C组与APN组小鼠肝、肺组织损伤未见明显差异;小鼠血清IL-1β及IL-6水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);免疫荧光染色示LC3B颗粒面积比较差异无统计学意义(P＞0.05)。<br>　　结论:<br>　　脂联素可显著改善脓毒症小鼠肝、肺组织病理损伤，降低小鼠血清IL-1β及IL-6水平，同时提高脓毒症小鼠肝、肺组织自噬水平。<br>　　第二部分 脂联素通过AMPK/ULK1介导自噬调控LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞炎性水平的研究<br>　　目的:<br>　　探讨脂联素是否通过AMPK/ULK1通路介导自噬调控LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子表达。<br>　　方法:<br>　　1.收集清洁级健康雄性C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞。<br>　　2.探讨自噬抑制剂对脂联素预处理LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子表达的影响。设置分组:对照组（C组）;LPS干预组（LPS组）;脂联素组（APN组）;LPS+脂联素组(LA组);LPS+自噬抑制剂3-MA组(L3组);LPS+脂联素+3-MA组（LA3组）。<br>　　3.探讨ULK1在脂联素调控自噬信号通路中的作用。设置分组:对照组(S组);LPS干预组（LPS组）;脂联素组(APN组);LPS+脂联素组（LA组）;LPS+ULK1抑制剂SBI-0206965组(LS组);LPS+旨联素+SBI-0206965组(LAS组)。<br>　　4.探讨脂联素是否通过AMPK调控自噬水平抑制炎症反应。设置分组:对照组（C组）;LPS干预组（LPS组）;脂联素组（APN组）; LPS+脂联素组(LA组);LPS+ AMPK抑制剂Compound C组（LC组）;LPS+脂联素+ AMPK抑制剂Compound C组（LAC组）。<br>　　5.上述子问题中，采用ELISA法检测各组小鼠腹腔巨噬细胞中IL-1β及IL-6水平;采用流式细胞仪检测各组活性氧水平;采用Western Blot检测各组小鼠腹腔巨噬细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ、AMPK、ULK1水平。<br>　　结果:<br>　　1.与C组比较，LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞16h后，小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β及IL-6水平增加，ROS水平升高，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平增加，AMPK水平增加(P＜0.05)。<br>　　2.与LPS组比较，LA组小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β及IL-6水平降低，ROS水平降低，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平进一步增加，ULK1、AMPK水平增加(P＜0.05)。<br>　　3.使用自噬抑制剂后，LA3组较LA组比较，小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β及IL-6水平增加，ROS水平升高，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平降低(P＜0.05)。<br>　　4.使用ULK1抑制剂后，LAS组较LA组比较，小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β及IL-6水平增加，ROS水平升高，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平降低(P＜0.05)。<br>　　5.使用AMPK抑制剂后，LAC组较LA组比较，小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β及IL-6水平增加，ROS水平升高，ULK1及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平降低(P＜0.05)。<br>　　结论:<br>　　在LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞细胞中，脂联素预处理可通过AMPK/ULK1通路，提高脓毒症小鼠自噬水平、抑制氧化应激、拮抗炎症因子IL-1β及IL-6的表达，介导抗炎保护作用。