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摘要本文从以下几部分进行论述：<br>　　第一部分 HLA-DMA基因rs1063478位点多态性与胶质瘤基因环境的关系<br>　　目的:<br>　　1.归纳分析与胶质瘤发病风险相关的环境因素。<br>　　2.检测两组受试者HLA-DMA基因rs1063478位点的多态基因型分布。<br>　　3.研究HLA-DMA基因rs1063478位点多态性与胶质瘤发病风险的关系。<br>　　4.探讨HLA-DMA基因rs1063478位点多态性-环境因素交互作用与胶质瘤发病风险的关系<br>　　方法:<br>　　1.收集两组受试者的基本信息，应用卡方检验探讨与胶质瘤发病风险相关的环境暴露因素。<br>　　2.应用PCR-RFLP技术检测90例胶质瘤病人及110例健康人HLA-DMA基因rs1063478位点的多态基因型分布。<br>　　3.检测两组病人基因型的分布与HWE(哈迪-温伯格平衡定律)的一致性。<br>　　4.应用Logistic回归分析评估HLA-DMA基因rs1063478位点多态性与胶质瘤发病风险的关系。<br>　　5.通过多因素回归分析研究HLA-DMA基因rs1063478位点多态性-环境因素交互作用与胶质瘤发病风险的关系。<br>　　结果:<br>　　1.与胶质瘤发病风险相关的基本因素分析<br>　　我们统计了90例胶质瘤病人及110例健康人受试者在年龄、性别、是否具有吸烟史、是否具有饮酒史、是否具有胶质瘤家族史、是否具有化学毒素接触史以及是否具有电离辐射暴露史方面的信息，并对相关信息进行x2检验，发现两组病人在年龄、性别、吸烟及饮酒史方面没有统计学差异(p＞0.05);在胶质瘤家族史方面，病例组（10例，11.1％）明显高于对照组（1例，0.9％），差异具有统计学意义(p=0.002);关于环境因素，与对照组相比(0.9％)，病例组有10％的病人具有化学毒素接触史，差异具有统计学意义(p=0.003)，由于放疗（4例）和职业暴露（9例），病例组共13例病人接触了电离辐射，两组病人遭受电离辐射的比例具有显著性差异（病例组14.4％，对照组1.8％，p=0.001）。表明胶质瘤家族史、化学毒素及电离辐射与胶质瘤发病风险有显著相关性。<br>　　2.HLA-DMA基因rs1063478位点的多态基因型分布<br>　　我们应用PCR-RFLP技术检测了90例胶质瘤病人及110例健康人HLA-DMA基因rs1063478位点的多态基因型分布，共检测出三种C/T多态基因型，分别为CC、CT及TT基因型，其中病例组CC基因型40例，CT基因型38例，TT基因型12例，CT+TT基因型共50例;对照组CC基因型68例，CT基因型36例，TT基因型6例，CT+TT基因型共42例。<br>　　3.两组病人的基因型分布与HWE的一致性<br>　　应用卡方检验计算两组病人的CC、CT以及TT等基因型分布频率情况，发现对照组基因型频率分布符合HWE平衡定律(x2=0.1822，p=0.6695)，病例组基因型分布也与HWE平衡相一致(x2=0.3809，p=0.5371)，提示两组病人的HLA-DMA基因rs1063478位点基因型分布具有很好的群体代表性。<br>　　4.HLA-DMA rs1063478位点多态性与胶质瘤发病风险的关系<br>　　通过单变量回归分析发现，TT突变纯合子基因型的频率，病例组高于对照组，胶质瘤的发病风险增加了3.40倍(OR=3.400，95％CI=1.184-9.764)。杂合子基因型CT可能是胶质瘤发病的风险因素，但是没有统计学意义上的显著关联(OR=1.794，95％CI=0.985-3.271)。CT+TT基因型比CC基因型更有胶质瘤发病风险，有统计学意义(OR=2.204，95％CI=1.149-3.566)。通过多元回归分析可以发现，在校正了年龄、性别、有无吸烟史、有无胶质瘤家族史、有无化学毒素及电离辐射接触史后，得出校正的OR，CT+TT基因型仍然增加了胶质瘤的发病风险，且具有统计学意义(校正OR=1.984,95％ CI=1.084-3.630)。<br>　　5.HLA-DMA基因rs1063478位点多态性-环境因素交互作用与胶质瘤发病风险的关系<br>　　9例有化学毒素接触史的胶质瘤病人中，有2例表现为纯合子CC基因型，有7例表现为CT+TT突变基因型，通过多因素回归分析，发现化学毒素虽是胶质瘤发病的风险因素，但是HLA-DMA基因rs1063478位点多态性与化学毒素没有交互作用(p=0.289，OR=3.093，95％CI=0.065-15.801);13例有电离辐射暴露史的病人中，有2例表现为纯合子CC基因型，有11例表现为CT+TT突变基因型，通过多因素回归分析，发现HLA-DMA基因rs1063478位点多态性与电离辐射暴露具有交互作用，而且这种交互作用显著增加了胶质瘤的发病风险(p=0.033，OR=5.359，95％CI=1.13-25.797)。<br>　　结论:<br>　　1.胶质瘤家族史、化学毒素及电离辐射与胶质瘤发病风险有显著相关性。<br>　　2.HLA-DMA基因rs1063478位点多态性和胶质瘤的易感性具有显著相关性。<br>　　3.HLA-DMA基因rs1063478位点多态性与电离辐射具有交互作用，这种交互作用使胶质瘤易感性显著增加。<br>　　第二部分 mTOR信号通路及Ki-67与高级别胶质瘤患者预后的相关性研究<br>　　目的:<br>　　1.检测p-AKT，p-mTOR，p-p7056K及Ki-67在不同级别高级别胶质瘤中的表达水平。<br>　　2.探讨mTOR信号通路相关靶蛋白对高级别胶质瘤预后的影响。<br>　　3.探讨Ki-67对不同级别高级别胶质瘤预后的影响。<br>　　方法:<br>　　1.根据病历资料及随访记录，记录所有研究对象的年龄、性别、术前Kanlofsky评分、无进展生存期和生存期。<br>　　2.取所有患者的肿瘤组织蜡块，切片行p-AKT，p-mTOR，p-p70S6K，Ki-67兔疫组化染色，根据细胞染色强度和阳性细胞百分比进行综合分析，判定p-AKT，p-mTOR，p-p70S6K及Ki-67的表达情况。<br>　　3.应用Kaplan-Meier单因素分析法对包括p-AKT，p-mTOR，p-p70S6K,Ki-67及病理级别等在内的12个预后影响因素进行生存分析，研究各预后影响因素对高级别胶质瘤预后的影响。<br>　　4.对单因素分析中p <0. 05者进行COX回归多因素分析，进一步探讨相关因素对高级别胶质瘤预后的影响。<br>　　结果:<br>　　1.在胶质瘤Ⅲ级中，p-AKT，p-mTOR，p-p70S6K和Ki-67的免疫组化染色呈中度阳性，在胶质瘤W级中，p-AKT,p-mTOR，p-p70S6K和Ki-G7的免疫组化染色呈强阳性。<br>　　2.应用Kaplan-Meier单因素分析法对包括p-AKT，p-mTOR，p-p70S6K,Ki-G7及病理级别等在内的12个预后影响因素进行生存分析，发现p-AKT,p-mTOR,p-p70S6K,Ki-67的表达情况与总生存率的关系具有统计学意义(p<0.05)。<br>　　3.对单因素分析中p<0.05者进行COX回归多因素分析，患者p-AKT(low，high)及Ki-67 (low,high)与生存期均无相关性(p>0.05);p-mTOR(low，high)及p-p70S6K(low,high)与生存期有相关性(p＜0.05 )。<br>　　4.p-mTOR阳性率与无进展生存期呈负相关(r=-0.838，p<0.001)，与生存期呈负相关(r=-0.777，p <0. 001)。p-p70S6K阳性率与无进展生存期呈负相关(r=-0.509,p <0.001)，与生存期呈负相关(r=-0. 531,P<0.001).<br>　　5.2组p-mTOR. p-p70S6K的表达情况与无进展生存期和生存期的关系分别制作成Kaplan-Meier生存曲线，两者之间无进展生存期对比有显著性差异(p<0.05),生存期对比差异有统计学意义(p<0.05).<br>　　结论:<br>　　1.mTOR信号通路中p-mTOR及p-p70S6K的表达水平与高级别胶质瘤患者预后密切相关，p-mTOR及p-p70S6K可作为对胶质瘤预后判断的客观性指标。<br>　　2.Ki-67表达水平与胶质瘤患者预后无明显相关性。