检索历史 清除

摘要妊娠是一个复杂、有序的过程，它包括胚胎植入、母体子宫的蜕膜化、胎盘的形成和分娩，这些事件相互作用，协调一致，最终产生一个健康的生命。胎盘是随着妊娠的进行而暂时出现的临时内分泌器官，它在整个妊娠期间维持并保护了胎儿的正常发育。在哺乳动物的胎盘中，多核的合体滋养层细胞由单核的细胞滋养层细胞融合而成，它是正常妊娠建立和维护必不可少的组成部分。<br>　　在调控胎盘滋养层细胞向合体滋养层细胞融合的过程中，人类内源性逆转录病毒囊膜蛋白Syncytins发挥着极其重要的作用，也是在哺乳动物中唯一公认的融合蛋白(Fusogen)。据报道，胎盘中特异性表达的逆转录病毒env基因编码的囊膜蛋白Syncytin-1、Syncytin-2可介导细胞与细胞的融合并对多核的合体滋养层的形成发挥关键作用，另外对病毒进入宿主、激发免疫抑制和对其他病毒的感染也有干扰预防作用。在人类胎盘中，Syncytin-2仅表达在部分细胞滋养层细胞中，并特异性地定位于细胞滋养层细胞和合体滋养层细胞的交界面，其受体MFSD2A更是特异性的表达于合体滋养层细胞中，这都预示着内源性逆转录病毒囊膜蛋白Syncytin-2在胎盘的发育中发挥着重要的作用。在本研究中，我们通过构建Syncytin-2野生型和21个氨基酸突变的表达载体（包括10个预测的N-糖基化位点缺失突变，1个单核苷酸多态性N118S诱导所出现的N-糖基化位点和10个位于重要功能结构域的非同义SNP)，观察其介导293T细胞的融合能力，进而研究Syncytin-2结构和功能的联系。在这21个突变体中，N133Q、N312Q、N443Q、C46R（CXXC结构域）和R417H（HRP和ISD结构域）完全失去了诱导细胞融合的功能，而N332Q、N118S、T367M（融合肽）、V483I（跨膜结构域）和T522M（胞内域）5个突变体的融合功能显著增强。同时，我们也证明了在293T细胞中，Syncytin-2的N133、N146、N177、N220、N241、N247、N312、N332和N443会发生糖基化。免疫共沉淀结果分析表明受体MFSD2A与Syncytin-2突变体N443Q、C46R、R417H和T367M的相互作用较弱，而与N118S有较强的结合能力。另外，我们对125例重度子痫前期患者、272例正常妊娠妇女Syncytin-2和26例早期胎停育样品编码区序列进行了测序，仅发现一个非同义杂合子单核苷酸多态性T522M频率有异。研究结果表明在融合蛋白Syncytin-2结构中，糖基化位点133、312、332和443对其融合功能极其重要，而SNP C46R、N118S、T367M、R417H、V483I和T522M可以改变Syncytin-2的融合功能。