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摘要天然免疫反应系统在抵抗乙型肝炎病毒(HBV)感染中发挥重要作用。作为肝脏最主要的组成，肝细胞在肝脏免疫调控中可能发挥了主导作用。本课题研究了HBV蛋白表达对肝细胞/肝癌细胞炎性反应的调控及其作用机制，为阐明HBV蛋白与肝细胞在肝脏疾病发生发展过程中的作用提供了研究基础。<br>　　方法：<br>　　1、构建HBV蛋白表达重组载体，转染肝细胞/肝癌细胞。通过荧光PCR研究肝细胞/肝癌细胞内炎性效应分子在转录水平上的表达变化趋势，利用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验(Western Blot)来研究炎性效应分子在蛋白水平的表达变化情况;<br>　　2、利用Western Blot和免疫荧光试验，借助特异的信号通路抑制剂，研究HBV蛋白引起的炎性效应中涉及到的信号通路及其作用;<br>　　3、构建HBV核心抗原(HBc)稳转细胞株，检测HBc在细胞增殖中的作用;<br>　　4、转染siRNA研究肝癌细胞内HMGB1在HBc促细胞增殖过程中的作用，结合Western Blot技术，研究涉及到的信号通路。<br>　　结果：<br>　　1、HBV大蛋白(LHBs)和HBc能够上调AIM2、IL-1β、IL-18、IL-6和TNFαmRNA等炎性基因的表达;中蛋白(MHBs)能够上调AIM2、IL-6和TNFα mRNA的表达;小蛋白(SHBs)除引起TNFα表达量上调外，对其它基因的表达无影响。在SMMC-7721、L-02和Huh7细胞中，LHBs、HBc和MHBs组IL-6表达量上调且在24小时达到高值。在HepG2和SMMC-7721细胞中，MHBs和HBc组TNFα表达量在转染6小时时达到高值，随后下降，在Huh7和L-02细胞中，变化趋势与此相反。在Huh7细胞中，MHBs上调HMGB1的表达，且在24小时达到高值，在L-02和SMMC-7721细胞中，随时间延长，MHBs组HMG1的表达量逐渐下降;<br>　　2、MHBs激活MAPK p38/NF-κB以促进IL-6的表达和分泌，这种效应依赖于内质网压力;在Huh7细胞中，MHBs活化NF-κB来上调HMGB1的表达，且引起HMGB1从细胞核转移到胞质;<br>　　3、HBc通过激活MAPK p38、ERK1/2和NF-κB来促进IL-6的表达和分泌，但此效应与内质网压力无关;在Huh7细胞中，HBc激活NF-κB以促进HMGB1的表达，但不会引起HMGB1从细胞核到胞质的移位;HBc促进Huh7细胞的增殖，HMGB1 siRNA抑制HBc的促增殖作用，同时也抑制HBc对ERK1/2的激活，但对MAPK p38信号通路无影响。<br>　　结论：<br>　　1、同一HBV蛋白在不同细胞株中引起的效应不一致，同一细胞株对不同HBV蛋白的反应也不同。总体来说，LHBs、MHBs和HBc会引起炎性基因表达的变化;除TNFα外，SHBs对肝细胞/肝癌细胞内其它炎性基因的表达无显著影响;<br>　　2、MHBs诱导产生内质网压力，激活p38/NF-κ B通路，上调IL-6的表达与分泌，增强HMGB1的表达，并导致其从核转移到胞质，表明，MHBs主要作为肝细胞/肝癌细胞的压力性刺激因子起作用;<br>　　3、HBc激活MAPK p38、ERK1/2和NF-κB，上调IL-6和HMGB1的表达，促进肝癌细胞增殖，表明，HBc作为促炎因子和促增殖因子，具有多重作用。