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摘要目的：<br>　　本研究以“实质等同性原则”、“个案分析原则”为基础，参照《农业转基因生物安全评价指南》进行，探讨复合性状转基因植物食用安全性评价方法，并对我国自主研发的转基因作物—转Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米进行食用安全性评价，为建立系统的转基因食品安全性评价体系进行探索。<br>　　从转Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米新表达蛋白的外源性制备入手，对微生物制备的重组蛋白与转基因玉米体内新表达蛋白进行等同性分析，在证明两者实质等同的前提下对外源性重组蛋白进行毒性、致敏性研究;对经PCR确认成分的转Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米进行关键营养素成分和抗营养因子分析以及亚慢性毒性研究。评价转CrylAb/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米的食用安全性。<br>　　方法：<br>　　1.Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)重组蛋白小鼠急性经口毒性:《食品安全性毒理学评价程序和方法》(GB15193.03-2003);<br>　　2.Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)重组蛋白体外模拟胃/肠道消化稳定性试验:《模拟胃肠液外源蛋白质消化稳定性试验方法》农业部869号公告;<br>　　3.Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)重组蛋白氨基酸序列分析:SORTALLER过敏原数据库;<br>　　4.转Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米定性PCR检测:用针对转基因抗虫和耐草甘膦玉米的特异基因以及玉米内标准基因zssⅡb的特异性引物进行PCR扩增，PCR扩增产物经2％琼脂糖凝胶电泳后，于凝胶成像系统上分析结果;<br>　　5.转CrylAb/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米营养成分及抗营养因子分析:GB/T5009-2010等;<br>　　6.转Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米大鼠90天喂养试验:《转基因植物及其产品食用安全检测大鼠90天喂养试验》(NY/T1102-2006)。<br>　　结果：<br>　　1.通过外源基因微生物高效表达系统，制备了外源基因表达的Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)蛋白，该两蛋白从分子量、质谱分析、免疫原性等方面与植物表达的目的蛋白具有实质等同性;<br>　　2.Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)重组蛋白小鼠急性经口毒性雌、雄均为LD50＞2000mg/kg·BW;<br>　　3.Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)重组蛋白在模拟胃/肠液中0-15s内全部消化，表明该两种蛋白在模拟胃/肠液中极易消化，不具消化稳定性;<br>　　4.Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)重组蛋白通过SORTALLER过敏原数据库进行比对，结果两种重组蛋白均为非致敏原;<br>　　5.转Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米进行定性PCR检测，结果表明转Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因玉米具有特异Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因，非转基因玉米没有该基因;<br>　　6.转Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米和亲本对照玉米的主要营养素水平和抗营养因子—植酸水平接近，主要营养素含量水平均在文献报道范围内;<br>　　7.转Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米与亲本对照玉米饲喂大鼠90天，结果显示在动物体重、进食量、食物利用率、血液学指标、血生化指标等方面虽然部分指标存在差异，但差异范围均在实验室历史对照范围内，没有发现性别一致性，并且未出现剂量反应关系，未见生物学意义。大体解剖和组织病理学检查均未见饲喂转基因玉米组的动物脏器出现明显异常改变。<br>　　结论：<br>　　通过研究结果表明，Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)重组蛋白未见明显的急性经口毒性，致敏性方面通过SORTALLER过敏原数据库进行比对，两种重组蛋白均为非致敏原，而且体外模拟胃/肠液消化稳定性试验提示两种蛋白均不具消化稳定性，可认为Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)重组蛋白具有潜在致敏性的可能性较低;在全食品安全性评价中，转Cry1Ab/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米的关键营养成分和抗营养因子与亲本玉米含量基本一致，亚慢性毒性试验未发现各检测指标存在生物学意义的改变，结果提示转Cry1A/Cry2Aj和G10evo(EPSPS)基因抗虫耐草甘膦玉米与亲本玉米之间具有实质等同性。