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摘要目的:<br>　　明确养血柔肝法“养血软坚胶囊”治疗骨关节炎的相关机制是否与miRNAs对软骨代谢及疼痛的调节有关，进而探索及补充养血柔肝法治疗骨关节炎的现代科学机制。<br>　　方法:<br>　　将60只SD大鼠随机分为空白组(N=20)、模型组(N=20)和中药组(N=20)，并对模型组和中药组大鼠进行ACLT造模成骨关节炎模型，模型验证造模成功后，予中药组大鼠灌胃饲养，药物采用基于养血柔肝法治则的养血软坚胶囊。4周后统一取材，取材包括关节软骨，血浆，背根神经节和腰椎脊髓背角。关节软骨进行病理切片、染色，并通过Mankin评分进行比较，分析三组实验动物软骨破坏情况。采用LCM技术捕获目标区域软骨细胞，并对其进行Western-Blot检测，分析MMP-3、MMP-13、Col2a1、GAPDH等蛋白的表达，并比较其灰度值。提取关节软骨组织的RNA，制备文库，使用FASTX工具包对数据进行预处理，过滤的测序序列用Bowtie工具得到miRNA表达值矩阵，miRanda鉴定差异表达的miRNA的靶基因，利用DAVID工具对差异表达的靶基因进行GO的富集分析和Pathway富集分析，构建网络图。并RT-PCR验证所得结果。通过RT-PCR检测血浆，背根神经节和腰椎脊髓背角组织的相关miRNAs表达。<br>　　结果:<br>　　空白组关节软骨表层基本光滑，表层未出现破坏，软骨细胞数量正常，个别染色较轻，少见裂缝形成，无血管翳样组织生成，软骨潮线基本完整。模型组关节软骨表层部分不平整，甚至有几处出现软骨软化现象，软骨细胞数量较空白组增多，且排列无序，并向软骨外层迁移，且部分出现细胞簇集现象，软骨钙化层增厚，有微裂隙出现，有的甚至出现血管翳样组织，着色较重。中药组关节软骨表面不平整，甚至出现软骨表层破损现象，软骨细胞较多且排列紊乱，基质淡杂。中药组MMP13与MMP3的表达下调而Ⅱ型胶原的表达明显上调，并共有35个miRNAs表达有差异。其中7个上调（共调控了1174个靶基因），28个下调（共调控了2216个靶基因）;对差异miRNAs的靶基因进行蛋白互作网络分析(PPI)后，明确连接度最高的几个节点为JUN、RHOA、CTNNB1、POLR2K、APP等，并获得了19个重要的靶基因。且三组关节软骨、血浆、DRG、腰椎脊髓背角中的miR-199a-5p，miR-142-5p，miR-140-3p，miR-485-5p，miR-300-3pand miR-9a-3p表达均有差异，有统计学意义。<br>　　结论:<br>　　养血柔肝法中药“养血软坚胶囊”很可能是通过对miR-199a-5p，miR-142-5p，miR-140-3p，miR-485-5p，miR-300-3p and miR-9a-3p等的调控以起到治疗骨关节炎的作用。