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摘要目的：<br>　　1.通过回顾分析小睑裂综合征患者的临床治疗情况，探索小睑裂综合征分期治疗的选择策略。<br>　　2.通过采集小睑裂综合征患者的血液样本，探寻在患者群中是否存在FOXL2编码区新的基因突变。<br>　　3.对于新发现的小睑裂综合征FOXL2编码区突变，通过构建质粒来研究突变位点的危害性。<br>　　方法：<br>　　1.通过回顾分析2008年1月至2016年4月就诊于中国医学科学院整形外科医院整形三科的小睑裂综合征患者治疗方案，对患者术前及术后的水平睑裂长度(horizontal palpebral fissure length，HPFL)、垂直睑裂高度(vertical palpebral fissureheight，VPFH)、内眦间距(inner intercanthal distance，IICD)及内眦间距与水平睑裂长度比(the ratio of IICD to HPFL，IICD/HPFL)进行统计学分析。<br>　　2.采集临床小睑裂综合征患者家系及散发患者外周血，提取基因组DNA，运用Sanger测序及毛细管电泳测序法对样本进行检测，测序结果使用Chromas、DNASTAR及GeneMapper V3.5软件进行分析。<br>　　3.构建携带野生型FOXL2基因的质粒pEGFP-N1-WT(WT)、携带c.274G＞T突变型FOXL2基因的质粒pEGFP-N1-M1(M1)、携带c.1793del突变型FOXL2基因的质粒pEGFP-N1-M2(M2)及携带c.971C＞T突变型FOXL2基因的质粒pEGFP-N1-M3(M3)共4种，将上述质粒及空载质粒pEGFP-N1-Control(Control)转染于HEK-293T细胞中，利用荧光显微镜观察编码蛋白质的表达情况，同时运用定量PCR(RT-PCR)方法测定FOXL2基因及靶基因OSR2与α-SMA的改变。<br>　　结果：<br>　　1.本研究分析了45位小睑裂综合征患者的治疗方案，患者年龄分布为10个月～21岁，其中女性24人，男性21人。所有患者术前与术后HPFL，VPFH，IICD及IICD/HPFL的变化差异均有统计学意义(P＜0.00)。一期手术患者与二期手术患者初次手术年龄的差异有统计学意义(P＜0.00)，年龄均值分别为(14±5.48)与(4.59±4.64)岁。<br>　　2.本研究共收集并检测小睑裂综合征患者样本24例，其中家系2个，散发患者11例;其中家系A均存在c.672_701dup30(p.Ala224_Ala234dup10)突变，家系B均存在c.672_701dup30(p.Ala224_Ala234dup10)突变;散发患者中共发现新的突变位点5个，分别为c.274G＞T(p.E92*)、c.17_93del(p.E9Rfs*61)、c.971C＞T(p.P324L)、c.931C＞T(p.H311 Y)及c.655C＞A(p.Q219K)。<br>　　3.实验结果表明:携带FOXL2基因突变位点c.274G＞T(p.E92*)、c.17_93del(p.E9Rfs*61)、c.971C＞T(p.P324L)的质粒M1、M2、M3所编码蛋白质无法在细胞核内正确定位;携带FOXL2基因突变位点c.274G＞T(p.E92*)、c.17_93del(p.E9Rfs*61)的质粒M1、M2影响眼睑发育相关基因OSR2及α-SMA表达，携带突变位点c.971C＞T(p.P324L)的质粒M3仅影响OSR2表达。<br>　　结论：<br>　　1.通过研究我们发现，在充分的术前评估基础上，一期手术治疗与二期手术治疗同样都能取得满意的治疗效果。在接受手术治疗的患者中，初次手术年龄对于治疗方案的选择产生了影响。<br>　　2.我们在研究中共发现5种新发突变:c.17_93del(p.E9Rfs*61)、c.274G＞T(p.E92*)、c.971C＞T(p.P324L)、 c.931C＞T(p.H311Y)和c.655C＞A(p.Q219K)，我们的研究扩大了小睑裂综合征FOXL2基因的突变谱。<br>　　3.FOXL2基因突变位点c.274G＞T(p.E92*)、c.17_93del(p.E9Rfs*61)、c.971C＞T(p.P324L)在细胞内的功能研究表明上述3个位点可能均是BPES致病性突变位点。