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摘要天然免疫是机体在长期的进化过程中逐渐形成的一种免疫防御机制，是机体抵抗病毒感染的第一道防线。病毒感染宿主细胞后，细胞内的模式识别受体（pathogen recognition receptors，PRRs）能够识别病毒的病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns，PAMPs)，起始一系列复杂的信号级联反应，诱导Ⅰ型干扰素及炎症基因的表达。随后，Ⅰ型干扰素通过JAK-STAT信号通路诱导大量的抗病毒蛋白基因——干扰素刺激基因(interferon stimulated genes，ISGs)的转录。这些抗病毒蛋白及细胞炎症因子共同抑制病毒的感染及复制，并促进适应性免疫反应的发生。<br>　　研究表明，RIG-Ⅰ样受体(RIG-Ⅰlike receprors，RLRs)成员RIG-Ⅰ(retinoic acid-inducible gene-1)和MDA5(melanoma differentiation-associated gene5)能识别病毒在感染与复制过程中释放在胞浆中的RNA。识别并结合病毒RNA的RIG-Ⅰ及MDA5发生构象变化，招募并激活位于线粒体上的重要接头蛋白VISA(也称作MAVS、IPS-1或Cardif)。活化的VISA发生朊病毒样聚集并招募TRAF蛋白（TRAF2、TRAF5及TRAF6）、激酶TBK1及IKK，形成VISA复合物。随后，激酶TBK1及IKK，分别激活转录因子IRF3及NF-κB，进而诱导Ⅰ型干扰素及炎症因子的产生。然而，过低或过高的Ⅰ型干扰素产生都会引起多种疾病的发生，严重威胁机体健康。因此，病毒诱导Ⅰ型干扰素产生的各个环节均受到机体严格的调控。<br>　　在本研究中，为了进一步揭示抗病毒天然免疫信号转导的调控机制，通过表达克隆筛选的方式，筛选到一个能够显著抑制Ⅰ型干扰素诱导表达的蛋白——GPATCH3（G-patch domain-containing protein3）。GPATCH3广泛表达于多个组织中，但该分子的生物学功能目前还未被报道。我们的研究发现，过量表达GPATCH3能剂量依赖性地抑制RNA病毒SeV(Sendai virus)诱导的IFN-β启动子、ISRE及NF-κB报告基因的激活。降低细胞中GPATCH3的表达能够增强SeV诱导的IFNBJ1、IFNB1下游基因ISGs以及炎症基因的转录，但对DNA病毒HCMV及双链DNA(dsDNA)HSV-120诱导的IFNB1的转录没有影响。与此一致，降低GPATCH3的表达能够显著地抑制SeV和VSV(Vesicular stomatitis virus)两种RNA病毒的复制。进一步构建了GPATCH3基因敲除细胞，与野生型细胞相比，GPATCH3基因敲除细胞受到RNA病毒感染后，IFNB1的转录显著地增强。在作用机制研究方面，发现，VISA是GPATCH3的作用靶标分子。病毒感染能够增强GPATCH3与VISA的相互作用。进一步研究发现，GPATCH3能够减弱VISA-TBK1及VISA-TRAF6的相互作用，通过抑制VISA复合物的组装从而负调控RLRs介导的天然免疫反应。<br>　　综上，我们的研究发现了一个参与调控RLRs信号通路的蛋白GPATCH3，并揭示了其作用机制。由于VISA是模式识别受体RIG-Ⅰ及MDA5下游的关键接头蛋白，且VISA复合物的形成是RLRs介导的信号通路中极其重要的一步。因此，我们的研究对于深入认识RLRs介导的抗病毒天然免疫反应的调节机制具有重要意义。另外，本研究首次阐明了GPATCH3的生物学功能，为研究该分子的其他生物学功能奠定了基础。