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摘要目的:<br>　　探讨SPA-1(Signal-induced proliferation associated protein1)基因表达水平的改变对食管癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移能力的影响及进一步研究其作用机制。<br>　　方法:<br>　　采用免疫组化技术来检测80例石蜡包埋的食管癌及其癌周组织标本中SPA-1蛋白的表达水平;采用RT-PCR技术检测SPA-1在食管鳞癌细胞株Ec-9706，Eca-109，TE-2及正常食管上皮细胞HEEC中的mRNA的表达量;采用瞬时RNA干扰技术在表达量较高的食管鳞癌细胞TE-2中干扰SPA-1基因，用Western-blot实验和RT-PCR验证干扰实验是否成功;采用MTT实验和流式细胞学技术检测SPA-1基因干扰前后TE-2细胞增殖变化和细胞周期改变;侵袭实验检测SPA-1基因干扰前后细胞侵袭能力的改变;Western-blot实验检测SPA-1基因干扰前后TE-2细胞内MMP3，MMP9，BRD4三种蛋白表达水平的改变，以确实SPA-1基因是否通过调节或间接调控MMP3/MMP9/BRD4/参与了食管鳞癌的进度和侵袭过程。划痕实验用于评估SPA-1基因表达水平的改变对细胞侵袭转移能力的影响。<br>　　结果:<br>　　1、SPA-1蛋白在食管癌组织的表达:免疫组化显示36例食管癌伴远处转移组织切片中SPA-1蛋白表达的阳性率为66.7％(24/36)，44例食管癌未转移组织切片中SPA-1蛋白表达的阳性率61.4％(27/44)，80例食管癌癌周组织切片中SPA-1蛋白表达的阳性率7.5％(6/80)，SPA-1蛋白在卡方检验中显示转移组的阳性表达率明显高于正常对照组和未转移组(P＜0.01)，而食管癌组织中转移组与未转移组的蛋白阳性表达率无显著差异（P＞0.05）。<br>　　2、SPA-1mRNA在食管癌细胞及正常食管上皮细胞中表达水平的检测:RT-PCR结果显示食管癌细胞株Ec-9706，Eca-109，TE-2中SPA-1mRNA表达含量分别为(6.76±0.60)、(4.84±0.70)和(8.16±0.85)，正常食管癌细胞HEEC中SPA-1mRNA表达含量为(1.32±0.15)，具有高度转移潜能的TE-2细胞中所含SPA-1mRNA的水平最高。<br>　　3、SPA-1基因对食管癌细胞增殖、侵袭的影响:采用瞬时转染技术成功干扰TE-2细胞中SPA-1基因的表达，siRNA-SPA-1-(+)-TE-2细胞株成功构建;MTT结果显示随着细胞培养时间的延长，从第3天开始，siRNA-SPA-1-(+)-TE-2细胞的增殖速度与siRNA-SPA-1-（-）-TE-2组相比明显减弱，并随着时间的延长，差异越显著;流式细胞仪的检测结果显示，与对照组细胞相比，siRNA-SPA-1-(+)-TE-2细胞G0/G1期比例显著增加(P＜0.05），发生明显的G0/G1期阻滞。划痕实验显示，siRNA-SPA-1-(+)-TE-2细胞与对照组之间的划痕愈合程度无显著性差异(P＞0.05），SPA-1基因表达并未对TE-2细胞的侵袭迁移能力造成影响。<br>　　结论:<br>　　抑制SPA-1基因可有效降低食管癌细胞的增殖能力，为阐明食管癌的发生机制及食管癌个体化治疗寻找新的靶点。