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多模态纳米载药系统131I-bevacizumab-PTX-SPIONs的构建及其特性

摘要目的:<br>  1.制备超顺磁性氧化铁纳米粒(SPIONs),研究其形态、粒径、饱和磁化强度以及水动力尺寸;<br>  2.制备载紫杉醇(PTX)超顺磁性氧化铁纳米粒,研究其形态、粒径;<br>  3.制备并初步鉴定131I-antiVEGFR(贝伐珠单抗)载紫杉醇超顺磁性氧化铁纳米粒(131I-bevacizumab-PTX-SPIONs),为131I-antiVEGFR在临床研究提供基础性条件。<br>  方法:<br>  1.PEG修饰的SPIONs的制备及物理特性分析<br>  (1)利用热分解法,以乙酰丙酮铁、DSPE-PEG2000为原料合成经PEG修饰的SPIONs。<br>  (2)使用投射电镜观察其形态及粒径大小,通过振动样品磁强计测量其饱和磁动力尺寸,最后利用粒径分析仪分析水动力尺寸。<br>  2.载紫杉醇(PTX) PEG修饰的超顺磁性氧化铁纳米粒的合成及物理特性分析<br>  (1)将超顺磁性氧化铁纳米粒分散在氯仿中,加入紫杉醇粉末,通过旋转蒸发法制备获得载紫杉醇(PTX) PEG修饰的超顺磁性氧化铁纳米粒。<br>  (2)观察其形态及粒径大小,并测量纳米粒的载药量和包封率。<br>  3.131I-bevacizumab载紫杉醇超顺磁性氧化铁纳米粒的制备及放射性化学纯度鉴定<br>  (1)制备需要反应体系中需要的缓冲溶液,2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲溶液和硼酸盐缓冲溶液。将已制备完成的载紫杉醇PEG修饰超顺磁性氧化铁纳米粒通过超滤离心替换于2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲溶液中,加入碳二亚胺和12mg的N-羟基琥珀酰亚胺固体粉末,去除多余的碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺。将样品放于刚制备好的硼酸缓冲液中,加入4mg的贝伐珠单抗,在摇床上常温孵育;利用Iodogen法对纳米颗粒进行131I标记,将标记后的纳米颗粒使用PD10柱凝胶进行分离纯化。<br>  (2)终产品经TLC方法质控。检测其放射性化学纯度、质量控制结果及体外稳定性检测。<br>  结果:<br>  1.PEG修饰的超顺磁性氧化铁纳米粒外观呈黑褐色,电镜下呈等轴晶形,具有良好的分散性。未经修饰的超顺磁性氧化铁纳米粒的平均粒径约为9.8nm,PEG修饰的超顺磁性氧化铁纳米粒的平均粒径约为12.5nm。<br>  2.载紫杉醇(PTX) PEG修饰的超顺磁性氧化铁纳米粒的平均粒径约为18.89nm,其载药量为0.2mg/mg Fe,包封率约为97.34±1.58%。<br>  3.放射性化学纯度:99%,TLC检测结果显示游离131IRf=0.7-0.9,标记产物131I-bevacizumab-PTX-SPIONs滞留在原点(Rf=0.1-0.2)。<br>  结论:<br>  本研究方法可实现多模态纳米载药系统131I-bevacizumab-PTX-SPIONs的成功制备;制备产物可充分纯化,放化纯度满足临床放射性药物使用要求,游离杂质粒子131I可充分剔除,为进一步开展临床试验提供了基础条件。

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