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摘要本课题从蕲春蕲艾(Artemisia argyi)根茎部分离纯化得到一株内生真菌命名为HCH285，之后进行菌种鉴定、bostrycin方法学构建，同时对该HCH285内生菌代谢产物和bostrycin进行安全性和活性分析，主要结果如下:<br>　　1.HCH285菌种鉴定。利用微生物学与分子生物学两种方法对HCH285内生真菌进行鉴定。微生物形态学观察发现菌落呈圆形，生长初期为白色绒状毛且生长蓬松，后期逐渐成红色且菌落背面的红色产物也清晰可见。HCH285菌丝体为无色有隔菌丝。它产单个、球形或椭圆形、黑色光滑的分生孢子。此外通过分子生物学技术对其ITS序列测定确定该菌株属于黑孢霉属球黑孢霉菌（Nigrospora oryzae）。<br>　　2.HCH285内生菌产bostrycin分离制备方法建立。利用多种化学试剂对HCH285内生菌代谢产物提取，确定乙酸乙酯为最佳萃取试剂，以半制备液相进行化合物分离，优化卷线孢菌素bostrycin的HPLC制备方法，使用高效分析型液相检测分离纯度，其分离制备方法为:柱温∶30℃，进样体积∶700μL，流速∶3mL/min，流动相比例:甲醇∶0.3％甲酸=50∶50(v/v)，检测时间∶30min，紫外检测∶02nm;采用400MHz核磁共振波谱仪进行结构鉴定确定为卷线孢菌素bostrycin。<br>　　3.Bostrycin活性分析。Bostrycin抗氧化活性分析证明，对三种自由基抗性顺序由大到小为O2-＞DPPH-＞OH-。它的抗菌活性表明有较好的抗菌作用，对革兰氏阳性菌比革兰氏阴性菌较好。CCK-8法体外抗癌活性研究表明对U251，B10F16癌细胞的半致死浓度分别为4.30μM和6.05μM。<br>　　4.Bostrycin及HCH285菌代谢色素的安全性分析。引入秀丽隐杆线虫(C.elegans)为生测材料，以食品级红曲红色素为对照，研究对C.elegans各生理指标的影响。试验表明HCH285菌产色素对C.elegans的急性与慢性毒性、摄食与运动能力、生长发育状态、卵块孵化率，均没有明显抑制作用且与食品级红曲红色素作用效果一致，综合各指标显示500μg/mL内为安全剂量。以相同方法和指标，分析bostrycin对C.elegans作用，确定剂量在10μg/mL内无毒副作用。