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摘要白细胞介素-6主要由T细胞、淋巴样细胞、角质细胞、内皮细胞、纤维原细胞以及单核细胞等在活化状态时分泌产生的，属于多效应的细胞因子。1986年，IL-6基因结构被阐明，并于当年第六界免疫学大会上被命名为白细胞介素-6。[1，2]。IL-6主要以自分泌或旁分泌方式发挥效应。它对其他细胞因子有调节作用[3]，在急性期反应、造血调节、免疫应答中发挥极其重要作用，它能激活靶基因，不但能作为内皮细胞、B细胞、T细胞、造血源细胞、破骨细胞等细胞的生长与分化因子，而且对中枢与外周的神经系统细胞的生长、分化、再生与降解发挥重要的作用。IL-6可以恢复并强化体内造血功能，在体内能够明显刺激血小板的产生[4，5]。另一方面， IL-6过量表达往往与某些疾病有关(Keto等，1997)[6]。总之，IL-6对放疗、化疗所致血小板减少，肿瘤、肝损伤等研究和治疗相关方面有着潜在的广泛应用前景。<br>　　本文采用基因工程技术，构建能够高效表达重组人白细胞-6(rhIL-6)的表达菌株，在中试规模下，高密度地发酵表达目的蛋白并分离纯化，获得高活性、纯度较高的rhIL-6，并对其相关理化性质进行分析。<br>　　根据人白细胞介素IL-6氨基酸序列，采用大肠杆菌的偏好密码子设计出核酸序列与引物，通过PCR扩增技术得到rhIL-6的全序列cDNA。选用pColdⅡ表达载体，将外源rhIL-6基因插入到表达载体pColdⅡ的多克隆位点，通过转化进入大肠杆菌BL21感受态细胞，得到高表达的大肠杆菌菌株。<br>　　rhIL-6重组菌株进行发酵培养表达，选用的发酵罐规模为200 L，使用的蛋白表达诱导物为IPTG。含rhIL-6融合蛋白的发酵液经离心收集菌体，菌体破碎收集包涵体，然后包涵体进行变性、亲和层析捕获和复性，获得融合蛋白;融合蛋白经层析脱盐、肠激酶（EK酶）酶切、亲和层析、体积排阻层析等纯化步骤，获得高活性、纯度较高的原液rhIL-6。<br>　　为验证和控制rhIL-6的质量，本文采用B9-11细胞增殖法测定rhIL-6活性，SDS-PAGE电泳和HPLC-SEC法对终产品纯度进行分析，质谱法对分子量进行分析，Edman降解法进行N端分析。结果表明，rhIL-6原液的比活性为0.97×107IU/mg; HPLC-SEC纯度为87％，SDS-PAGE电泳纯度大于95％;质谱法分析rhIL-6的分子量为20894 Da，与理论分子量一致;确认N端正确。<br>　　综上所述，我们利用现代基因工程技术实现了重组人白细胞介素-6在大肠杆菌中的高效表达，建立了重组人白细胞介素-6的发酵和纯化工艺，并完成其理化性质的分析，为推进其工业化生产奠定了基础。