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摘要在生理学的研究中，单细胞层次进行神经递质和神经调质释放的实时动态分析具有至关重要的意义。单细胞安培法(Single-Cell Amperometry)因为具有高的时间分辨率和在单细胞层次的可操作性，因而特别适合在单细胞层次神经传递的研究。然而，目前这方面的工作绝大多数是针对于单胺类递质的研究，研究范围存在较大的局限。迄今为止，抗坏血酸在单细胞层次释放的研究大多数是使用高效液相色谱分析来实现的。但是由于该方法时间分辨率较差，无法实现释放动力学的研究。另一方面，在对于神经递质（例如，单胺类递质）的囊泡释放的研究过程中，同一物种但性别不同其分泌行为是否存在差异，尚没有定论。基于以上背景，本论文开展了以下两方面的研究:<br>　　(1)利用碳纤维为电极的单细胞安培法，选择性地记录了大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞内源性抗坏血酸的释放。实验结果表明，碳纤维电极在弱碱溶液中电化学处理后，可以实现抗坏血酸在低电位下(0.0V vs Ag/AgCl)的电化学氧化，进而实现其在其它物质（如肾上腺素、去甲肾上腺素以及多巴胺）共存情况下的选择性测定。基于此，我们成功直接观察了大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞内抗坏血酸的囊泡释放过程，并且发现这种释放过程与经典的囊泡传输机制类似，具有细胞外钙离子的依赖性。同时，利用所建立的方法，我们还定量分析了抗坏血酸囊泡释放的动力学过程。<br>　　(2)利用大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞为模型，在单细胞层次研究了来源于不同性别物种的细胞单胺类递质的分泌行为。嗜铬细胞因为起源于神经嵴，具有与交感神经相同的起源。同时，嗜铬细胞又是一种内分泌细胞，可以通过囊泡传输途径释放儿茶酚胺进入血液循环参与应激过程。通过培养雄性和雌性大鼠的肾上腺髓质嗜铬细胞，我们记录并研究了两种性别来源的嗜铬细胞的分泌动力学。结果发现，雌性大鼠来源的嗜铬细胞囊泡释放要比雄性的快，但是平均释放量却低于雄性。这种差异可能是细胞内外钙离子的共同参与而引起的不同。进一步实验表明，在两类不同细胞的细胞膜表面，钙离子通道以及囊泡释放过程相关蛋白SNAP-25在转录水平也表现出差异，这些差异可能是导致性别差异而引起的分泌行为不同的可能原因之一。