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摘要动物模型是生命科学领域研究使用的重要工具之一，由于存在多种CRE工具鼠可以方便实现条件性敲除等优势，小鼠受到研究者们的青睐。<br>　　随着基因编辑技术的快速发展，将其运用于各种细胞系和动物中的研究与日俱增。其中，最受瞩目的基因编辑技术是CRISPR/Cas9（规律成簇的间隔短回文重复/CRISPR相关蛋白9）系统，它具有设计简单、效率高等优势。因此，本论文利用该系统开展了以下两方面的研究工作：<br>　　首先，我们利用CRISPR/Cas9系统获得了Ndufs4基因敲除小鼠。临床研究发现在多例亚急性坏死性脑脊髓病(Leigh Syndrome，LS)病人中存在Ndufs4基因突变，我们研究发现敲除小鼠的运动能力比野生型小鼠显著低下，该表型与LS病人类似。我们进一步发现，敲除小鼠3周出现脱毛的现象，体重比野生型小鼠轻，大多数小鼠活不到成年，幸存的小鼠生殖能力弱，无法自然交配获得子代，随后的切片染色显示敲除小鼠的卵巢中能见各级卵母细胞，睾丸中能见成熟精子，其后我们使用了胞浆内单精子注射法(Intracytoplasmic sperm injection，ICSI)发现纯和敲除小鼠的子代在早期胚胎发育过程中受到了阻碍。<br>　　其次，我们尝试利用PITChs系统及HMEJ系统两种基因敲入策略获得STRA8-eGFP转基因小鼠。STRA8被认为是减数分裂起始的标志蛋白：当生殖细胞进入减数分裂，Stra8基因启动表达，随后下降。因此，建立STRA8的荧光报告小鼠对于生殖发育的研究具有重要意义。本文运用PITChs法可以获得敲除胚胎，但注射后的胚胎大部分发育停滞在囊胚期;而采用HMEJ法获得的在囊胚阶段有较高的整合效率，且胚胎发育较好，目前该方面的研究工作还在继续开展。<br>　　综上所述，本论文主要利用CRISPR/Cas9技术获得生殖发育研究相关的转基因小鼠，成功获得Ndufs4基因敲除小鼠和STRA8-eGFP基因敲入胚胎，这对生殖细胞发育进一步研究有促进作用。