检索历史 清除

摘要心脑血管疾病是威胁现代人类生命安全的第一大死因，由血栓栓塞所致的心肌梗死、脑梗死等死亡总数为各病因之首。血栓的形成原因复杂，但随着人们对血栓形成机制的了解，已发现血小板的聚集、粘附功能与血栓的形成密不可分。因此，阻止最初的血小板聚集黏附，已成为新的抗血栓治疗策略。<br>　　本研究采用碱法和酶法提取牦牛皮明胶，通过生化手段获得一系列不同分子量分布明胶。实验采用SDS-PAGE测明胶分子量分布、紫外可见光谱和傅里叶红外变换光谱研究不同分子量明胶键型和基团、差示扫描量热仪分析变性温度、原子力显微镜观察明胶纤维微观结构、高效液相法分析其氨基酸种类和含量，并对其功能性质（起泡性、乳化性和抗氧化性）进行测定。再通过电阻法和流式细胞分析法考察不同方法制备的不同分子量分布的牦牛皮胶对血小板聚集的影响。<br>　　主要结论如下:<br>　　1、通过酶解法和碱法制得一系列不同分子量大小和分布的牦牛皮明胶，其中碱法样品为A1-A6（A1的分子量约为72-180kDa，A2为50-130kDa，A3为34-55kDa，A4为34-43kDa，A5为17-26kDa和26-43kDa，A6低于17kDa，分子量逐渐减小）。酶法样品为E0-E48（酶解0、1、2、6、12、24、36和48h，分子量逐渐展宽）。<br>　　2、通过对不同分子量大小和分布的牦牛皮明胶理化性质分析，发现牦牛皮明胶变性温度较高(76-177℃)，高于目前已知的绝大多数的哺乳动物和海洋生物类来源的明胶变性温度，说明牦牛皮明胶具有优良的热稳定性。其中碱法制备明胶变性温度(104-177℃)整体高于酶法制备明胶变性温度(76-121℃);<br>　　3、酶解法明胶抗氧化作用不明显，而碱法小分子量牦牛皮明胶具明显抗氧化作用，DPPH自由基清除实验表明A2-A6的DPPH自由基清除活性均高于50％，A6为68.41％;FRAP亚铁离子还原能力实验表明A6的FRAP总还原能力为1.17mmol/g，A1-A5为0.11-0.30mmol/g;ABTS总抗氧化能力实验表明A6的ABTS总抗氧化能力为0.68mmol/g，A1-A5为0.05-0.21mmol/g。宽分子量分布的明胶乳化能力和起泡性质更好。这些性质可使牦牛皮明胶应用于食品添加剂等领域;<br>　　4、流式细胞分析法体外血小板凝聚率实验初步表明，在ADP作为促凝剂的情况下，与空白组(19.6％)和模型组(27.3％)对比，碱法制备牦牛皮明胶分子量小于17kDa的血小板凝聚率为40.4％，差异极显著(P＜0.01)，说明碱法制备分子量小于17kDa的牦牛皮明胶具促血小板聚集的作用。