换一批
换一批摘要油菜素甾醇是一类在植物的发育过程中起重要作用的固醇类激素。为了更全面的了解油菜素甾醇的信号转导，我们以sud1为材料进行EMS诱变筛选，得到一个新的突变体bin2-sf,它完全抑制了sud1的表型特征，表现出卷曲的叶片，缩短的叶柄。bin2-sf的BIN2基因第308位的丝氨酸突变为苯丙氨酸。由于bin2-1不育使之不能成为很好的遗传材料，而我们得到的bin2-sf不仅具有BIN2功能获得型突变体的表型，而且能够结足够多的种子。以bin2-sf为材料筛选抑制子，我们得到一个与BRI1的过表达表型相似的突变体-robin1(revertant of bin2-sf1)。robin1可以部分恢复油菜素甾醇合成突变体和信号中断突变体的表型。ROBIN1过表达能够增强bri1-5生长缺陷的表型，在野生型中的过表达能够产生极端矮化的转基因植物。ROBIN1编码一个HECT类型的E3连接酶。免疫印迹实验证明robin1中BRI1的蛋白含量明显增加。过表达BRI1能够产生与robin1类似的表型。一系列的分子，生化实验表明BRI1的积累不是由于蛋白质降解变慢引起而是由于蛋白质合成的增加，并且我们还发现robin1中BRI1的转录水平也没有明显的改变，说明蛋白质合成的增加并不是转录水平引起的。生理，生化和分子生物学实验证明ROBIN1是参与油菜素甾醇信号通路的负调控因子，它通过抑制BRI1的蛋白合成而阻止油菜素甾醇的信号转导。
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