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摘要环糊精(CDs)分子略呈锥形，上宽下窄、两端开口、中空圆筒状，空腔内部为疏水性，外部为亲水性，由于其独特的筒状结构和内疏水外亲水的性质，环糊精具有主客体分子包合作用，可以包合特定的分子。环糊精无毒无害，其包合物可以增强稳定性、增大溶解度、减小不良反应。因此，环糊精可作为一种合适的药物载体，广泛应用于医药领域。由于环糊精在水中溶解度及包合能力，环糊精的修饰及改性已经成为当前一大热门。羧甲基-β-环糊精(CM-β-CD)是β-环糊精的衍生物，在pH＜4溶液中的溶解度低，在pH＞4溶液中溶解度极高，其羧基解离，结构疏松，自流动性好，故在人体肠道环境中溶解度高，可以用于药物延长释放的剂型中，溶血性更低。<br>　　细胞穿膜肽(CPPs)是一类能够携带大分子的物质进入到细胞的短肽，具有较好的穿膜转运能力。如今许多生物大分子对治疗诸多疾病有重要作用，但由于首过效应、细胞屏障作用等障碍，大分子药物很难透过细胞膜进入细胞内，这限制了有治疗价值的生物大分子在医药领域的应用，细胞穿膜肽的发现及应用在极大地程度上解决了这一难题。细胞穿膜肽可作为载药材料在体内外入胞转运，具有其他生物大分子转运无法比拟优势:运载效率高、毒性较小、运载种类多、应用的剂型广范等。已有实验表明，影响细胞穿膜能力的关键因素是胍基，而八聚精氨酸(R8)中富含胍基，因此穿膜转运能力较强。<br>　　R8-CM-β-CD（八聚精氨酸-羧甲基-β-环糊精)是本实验室研发的新型入胞转运载药材料，由CM-β-CD（羧甲基-β-环糊精)与R8（八聚精氨酸)经化学反应后合成，经过之前的实验证明，R8-CM-β-CD包合药物能力强，溶解性好，平均分子量大小适中。<br>　　目的：<br>　　R8-CM-β-CD的体外毒性还未评价。本实验通过R8-CM-β-CD与已有的CM-β-CD和β-CD做对比，比较评价其毒性作用，探讨其作为载药材料的可能入胞机制，并研究这一新型材料对P-gp药泵的抑制作用。<br>　　结果：<br>　　1.R8-CM-β-CD对兔红细胞的溶血作用，对细胞膜的破环程度，类似于CM-β-CD，显著低于β-CD。<br>　　2.R8-CM-β-CD对caco-2的细胞毒性有浓度依赖性，其毒性与CM-β-CD不相上下，明显低于β-CD。<br>　　3.R8-CM-β-CD的入胞机制可能与网格蛋白介导的胞吞、小窝蛋白介导的胞吞以及巨胞饮有关。<br>　　4.R8-CM-β-CD对P-gp药泵具有一定的抑制作用，类似于维拉帕米，促进药物的吸收。<br>　　5.R8-CM-β-CD可包合胰岛素，并非物理混合或化学连接，是将胰岛素包合进环糊精的空洞中。<br>　　结论：<br>　　本实验显示R8-CM-β-CD具有低毒性与低溶血性，对血红细胞的溶血作用较低，这为R8-CM-β-CD作为药物载体的安全性提供有用的信息。在入胞机制的研究中我们对R8-CM-β-CD的入胞机制有了初步的了解，其入胞机制是在ATP的参与下，由网格蛋白介导的内吞作用入胞及以巨胞饮的入胞方式。在对P-gP抑制的实验中我们发现R8-CM-β-CD可以抑制P-gp的外排。本实验也证明R8-CM-β-CD可包合大分子药物，包合后的大分子药物不仅增强了吸收能力，也增加了其稳定性。