换一批摘要狂犬病是由病毒引起的世界性人兽共患病,人和动物一旦发病100i死亡.狂犬病的暴露后预防(Postexposure Prophyaxis,PEP)主要是通过疫苗,对于严重暴露者(Ⅲ)而言,需同时注射狂犬病毒免疫球蛋白.采用单抗鸡尾酒制剂代替HRIG用于狂犬病的暴露后治疗.与抗血清相比,单抗鸡尾酒具有很多优点:重复性好,特异性强,用量少,易于标准化,能大量生产,而且病原污染的可能性降低.在该文中,首次报道了运用噬菌体抗体库技术获得人源抗犬病毒基因工程抗体Fab段基因及其表达,并首次运用杆状表达系统表达了人源狂犬病 毒全抗体.用超离纯化的狂犬病毒aG株抗原和四株狂犬病毒特异单抗的原捕捉法,筛选上述噬菌体抗体库,经过几轮筛选,最后获得20株Fab阳性克隆,并最终鉴定了三株.将以上三 单抗的基因克隆进pBluescript(ks)载体进行序列测定,将获得的序列与GeneBank库中已有 的序列进行比较,发现所获Fab序列的CDRs为新序列.G10与B2两株单抗中,G10的轻链为κ 链,B2的轻链为λ链.将单抗G10的Fab段基因亚克隆进杆状病毒表达载体,与人源Fc片段基因相连接,构建出重组表达质粒.将重组表达质粒DNA与线状杆状病毒DNA共传染sf9细胞, 通过空斑纯化,分离得表达人抗体基因的重组杆状病毒.对重组杆状病毒进行扩增,并将扩增的病毒进一步感染昆虫细胞使抗体基因得到表达.采用Protein G亲和层析的方法纯化了 表达的全抗体.
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2004-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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