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摘要急性肺损伤(acute lung injury，ALI)迄今尚无有效治疗手段，是一种临床常见的危重症，对患者和社会造成严重的负担。核因子Kappa B(nuclear factor kappaB，NF-kB)信号通路是启动炎症反应的关键通路，糖皮质激素可以阻断NF-kB信号通路，对急性肺损伤的治疗具有深刻意义，然而其不良反应局限了其应用。本研究以地塞米松(dexamethasone，DEX)为模型药物，构建细胞间粘附分子1(intercellular adhesion molecule1，ICAM-1)单克隆抗体修饰地塞米松纳米结构脂质载体(nanostructured lipid carriers，NLCs)，以期将地塞米松高效递送至病变肺部，在发挥疗效的同时潜在性降低药物的不良反应，为ALI的临床治疗提供理论依据。<br>　　采用地塞米松为模型药物，单硬脂酸甘油酯(monostearin，MS)为固态脂质，中链脂肪酸甘油脂(medium chain triglycerides，MCT)为液态脂质，聚乙二醇单硬脂酸酯(Polyethylene glycol monostearate，PEG2000-SA)和单氨基终端的聚乙二醇单硬脂酸酯(monoamino-terminated polyethylene glycol monostearate，NH2-PEG2000-SA)为两性脂质材料，以水性溶剂扩散法制备阴离子地塞米松NLCs。以N，N'-琥珀酰亚胺基碳酸酯为链接，制备anti-ICAM-1单抗修饰阴离子地塞米松NLCs(ICAM/DEX/NLCs)和anti-IgG单抗修饰阴离子地塞米松NLCs(IgG/DEX/NLCs)。基于表面电荷对纳米粒的体内药动学具有重要影响，本研究通过控制脂质总量不变，以3％质量比的硬脂胺(octadecylamine，ODA)代替原处方中3％质量比的MS，采用相同方法制备anti-ICAM-1单抗修饰阳离子地塞米松NLCs(ICAM/DEX/ODA-NLCs)和anti-IgG单抗修饰阳离子地塞米松NLCs(IgG/DEX/ODA-NLCs)，进一步考察并比较阴、阳离子地塞米松NLCs的理化性质等特性、以及对ALI的修复作用。制备得到的ICAM/DEX/NLCs，IgG/DEX/NLCs，ICAM/DEX/ODA-NLCs和IgG/DEX/ODA-NLCs纳米粒形态圆整、大小相对均一。纳米粒粒径相近，分别为249.9±21.5 nm，229.3±17.2 nm，235.9±1.8 nm和227.9±7.4nm;Zeta电位分别为-30.3±0.5 mV，-28.7±1.1 mV，37.4±0.7 mV和34.2±3.3 mV;包封率分别为90.11％±1.34％，85.72％±0.84％，82.93％±0.94％和81.39％±3.23％;载药量分别为3.62％±0.05％，3.49％±0.03％，3.34％±0.04％和3.28％±0.13％。体外药物释放研究结果表明，地塞米松NLCs中药物均可持续释放24 h以上，累积释放率达59.0％以上。<br>　　采用人血管内皮细胞株(human vascular endothelial cell line，EAhy926)为模型细胞，以脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)刺激构建ALI炎症内皮细胞模型，考察地塞米松NLCs的细胞毒性。地塞米松NLCs对活化的EAhy926细胞的抑制率存在剂量依赖性。阴离子ICAM/DEX/NLCs和IgG/DEX/NLCs的细胞半数致死量(IC50)在600μg/mL以上，阳离子ICAM/DEX/ODA-NLCs和IgG/DEX/ODA-NLCs的IC50值在600μg/mL以下，IC50值随着ODA的修饰而减小。细胞摄取研究表明，相对于ICAM/DEX/ODA-NLCs，ICAM/DEX/NLCs在静息的EAhy926细胞上的摄取效率较低，而在活化的EAhy926细胞上的摄取效率较高;相对于IgG/DEX/NLCs，ICAM/DEX/NLCs在活化的EAhy926细胞上同样体现出显著摄取优势。研究结果提示阴离子ICAM/DEX/NLCs可潜在性更高效的将地塞米松转运至活化的内皮细胞、从而提高对病变内皮的干预能力。细胞转运研究表明，ICAM/DEX/NLCs经CAM介导的内吞途径(CAM-mediated endocytosis)被EAhy926细胞摄取。<br>　　以Balb/c小鼠为模型动物，采用暴露式气管滴注脂多糖构建ALI小鼠模型，之后经尾静脉静注给药，考察地塞米松NLCs在正常小鼠和ALI小鼠模型体内的肺分布。相对于ICAM/DEX/ODA-NLCs，ICAM/DEX/NLCs在正常小鼠体内的肺分布较低，而在ALI小鼠模型体内的肺分布较高;相对于IgG/DEX/NLCs，ICAM/DEX/NLCs在正常小鼠和ALI小鼠模型体内的肺分布均较高。研究结果提示阴离子ICAM/DEX/NLCs可潜在性更高效的将地塞米松递送至ALI小鼠肺脏、从而提高对病变肺脏的修复效力。此外，通过尾静脉注射给药，考察游离地塞米松、 ICAM/DEX/NLCs、 IgG/DEX/NLCs、 ICAM/DEX/ODA-NLCs和IgG/DEX/ODA-NLCs对ALI小鼠模型的体内药效。经给药24 h，ICAM/DEX/NLCs对小鼠肺内TNF-α和IL-6炎性因子水平的抑制作用强于其他药物，同样，对炎症细胞浸润也强于其他药物。此外，相对于其他治疗药物，ICAM/DEX/NLCs在给药12h和24 h后更显著的修复了ALI小鼠模型肺内炎性细胞浸润、充血及肺泡隔增厚等病理表征。<br>　　研究结果表明，相对于阳离子ICAM/DEX/ODA-NLCs，所制备的阴离子ICAM/DEX/NLCs具有较低的细胞毒性、显著的炎症内皮细胞内在化特性和在ALI小鼠体内的肺分布优势。可通过良好的肺血管内皮细胞结合功能，潜在性的改善地塞米松在ALI小鼠模型体内的肺分布，有望减少药物不良反应，实现对ALI的安全、有效治疗。