检索历史 清除

摘要目的：为了构建一种能够在血液循环中主动靶向到达肿瘤组织进入癌细胞，在高浓度谷胱甘肽刺激下，还原响应释放抗癌药物，发挥抗癌作用的载药体系。本课题制备具有稳定性和生物相容性好、靶向和还原响应释药的药物载体(RGPD)，结合阿霉素(DOX)制得还原响应靶向纳米氧化石墨烯载药体系(RGPD-DOX)，研究其抗癌活性。通过药物传递系统靶向可控释给药，减小药物对正常组织的损害，降低传统化疗药物的毒副作用。<br>　　方法：1.利用GO的羧基和RGD肽、PEG-NH2的氨基在活化剂1-(3-二甲氨基丙基)3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺条件下酰胺缩合，制备具有良好生物相容性的靶向纳米氧化石墨烯载体，再利用已经接枝在氧化石墨烯上的PEG-NH2的氨基与DTPA的羧基进行酰胺缩合，制备还原响应靶向纳米氧化石墨烯药物载体RGPD;2.采用红外光谱检测分析(FTIR)、X射线光电子能谱分析(XPS)、扫描电镜(SEM)、透视电镜(TEM)等对还原响应靶向纳米氧化石墨烯药物载体进行表征;3.利用功能化的氧化石墨烯药物载体RGPD上的羧基与DOX的氨基进行结合，制备还原响应靶向纳米氧化石墨烯载药体系(RGPD-DOX)，通过紫外可见分光度法及透析法研究其载药释药性能;4.利用近红外光热照射研究功能化的氧化石墨烯药物载体RGPD的光热性能;5.用MTT法检测载体RGPD对人肝癌HepG-2细胞、人正常肝细胞7702的体外细胞毒性。6.MTT法测定载药体系及载药体系联合近红外热疗后对癌细胞生长的抑制情况。<br>　　结果：1.成功制备了还原响应靶向氧化石墨烯药物载体(RGPD)并通过FTIR、XPS、SEM进行结构及形貌的鉴定。2.制备了还原响应靶向氧化石墨烯载药体系，当DOX用量为5mg，载体的负载效率为0.76mg/mg。在模拟肿瘤环境体外进行释药，谷胱甘肽浓度为10mM的pH=5.50PBS溶液下释药率可达88.72％。3.用808nm近红外激光照射载体，同一照射时间下，载体浓度越大，温度越高，其中当照射时间为5min，载体浓度为Oμg/mL，温度为32℃，而载体浓度为0.78μg/mL，温度达到42℃。4.体外细胞毒性研究，当在载体浓度为100μg/ml下孵育细胞时，人正常肝细胞7702细胞的活力为85.24％。5.还原响应靶向纳米氧化石墨烯载药体系RGPD-DOX联合光热疗法抗癌活性显著(p＜0.05)。在载药体系浓度为1.56μg/mL时，未联合光热疗组，计算得到肿瘤细胞Hep-G2的抑制率为55％;而载药体系联合光热疗组，肿瘤细胞Hep-G2的抑制率达到78％。<br>　　结论：制备了具有良好的稳定性和生物相容性，具有靶向性，还原响应释药的药物载体RGPD，并评价了其特殊的光热性能和载药释药性能。在体外实验研究中，得到载药体系与光热疗法相结合具有较好的抗癌活性。