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磷酸基团在Amelogenin多肽调节早期釉质龋再矿化行为中作用的研究

摘要釉原蛋白(amelogenin)是牙釉质矿化过程中的主要细胞外基质蛋白。仿生再矿化是通过有机基质诱导脱矿的牙齿再矿化从而得到形态和功能上高度仿生的牙体组织。我们前期研究发现,重组Amelogenin多肽可以促进早期釉质龋再矿化,并且具有与钙离子结合的能力,与钙磷等结合形成稳定的ACP,抑制溶液中磷酸钙晶体过早形成,最终在矿化溶液中形成高度排列有序的羟基磷灰石晶体。另外,重组Amelogenin多肽还可以渗透进入到龋损表层下的区域。研究证明,釉原蛋白N末端具有唯一的磷酸基团,能够结合钙离子,稳定矿物成核前体-无定形磷酸钙(amorphous calcium phosphate,ACP),防止ACP过早沉积形成无序晶体。因此我们认为重组Amelogenin多肽在早期釉质龋再矿化过程中可能具有‘离子携带器’作用。<br>  目的:本实验通过体外再矿化实验研究单磷酸基团在重组Amelogenin多肽调节人工早期釉质龋再矿化过程中的作用,为研发能促进早期釉质龋损产生生物矿化组织多等级结构的再矿化防龋制剂提供理论依据。<br>  方法:使用新鲜拔除,表面釉质完整无裂纹的牛牙制备人工早期釉质龋标本,随机分为4组:A组:氟化再矿化溶液处理组;B组:单纯再矿化溶液处理组;C组:100μg/ml重组Amelogenin多肽再矿化溶液处理组;D组:100μg/ml非磷酸化重组Amelogenin多肽再矿化溶液处理组。每天更换新鲜的再矿化溶液,再矿化12天。再矿化结束后,使用横断显微放射照相法(transverse microradiography,TMR)对每个样本脱矿前后的矿物丢失量和脱矿深度进行测定,从而计算得到每个样本的矿物质获得量和矿化深度。<br>  结果:含磷酸基团的重组Amelogenin多肽组矿物获得量和矿化深度比不含磷酸基团的非磷酸化重组Amelogenin多肽组高,并且有统计学意义(P<0.05)。<br>  结论:单磷酸基团在重组Amelogenin多肽调节促进早期釉质龋再矿化过程中有重要作用。

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