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摘要人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus，HPV）主要感染人体皮肤和粘膜组织，引起增生性病变甚至恶性肿瘤。高危型别的HPV的长期感染是引发宫颈癌、肛门癌、头颈癌、口咽癌等恶性肿瘤的主要诱因。全球每年约57万宫颈癌新发病例，死亡病例高达31.1万例。目前宫颈癌的治疗手段有限，手术切除对人体伤害较大且有复发的风险，因此，开展HPV治疗性疫苗的研究刻不容缓。癌蛋白HPVE6和E7在肿瘤发生发展进程中起关键作用，被认为是干预和治疗的关键靶分子，因此对癌蛋白E6和E7的结构和功能展开深入的研究具有十分重要的意义。<br>　　本研究分别利用原核表达系统和真核表达系统等多途径对HPV E6和E7蛋白的上清可溶性表达进行了探索，最终在pTO-T7载体上取得突破，经过密码子优化、表达菌株、洗脱条件和储存缓冲液等条件的探索和优化，克服了癌蛋白E7在原核表达系统中易聚集沉淀的难题，建立了一套稳定的表达纯化体系，获得了纯度90％以上、均一性和稳定性均良好的HPV18E7蛋白，并对其展开了单克隆抗体的筛选，共获得55株与HPV18E7蛋白具有良好反应性的单抗细胞株。<br>　　本研究进一步对其中26株反应性优良的单抗细胞株展开抗体纯化和性质鉴定工作，包括抗体亚型、抗原抗体反应性、线性及构象和型特异性等。建立了HPV18E7单抗盘，并且获得了1株反应性良好的型特异性构象抗体9A5、6株反应性良好的型特异性线性抗体(2E8、14E5、17F2、17F3、8A7、5C5、18E7和3B5)、1株反应性较弱的型特异性构象抗体(18E6)、6株两型交叉抗体(1A12、4A10、8E6、17A3、14A6和11E8)和1F6这株六型交叉线性抗体。<br>　　综上，本研究建立了HPV18致癌蛋白E7可溶性表达和纯化体系，获得了高纯度且性质稳定的HPV18E7蛋白并建立了单抗盘，为后续开展HPV18E7蛋白结构解析、功能研究和治疗性疫苗或药物开发奠定了坚实的基础。