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摘要季节性流感及流感大流行对人体健康及全球经济造成了严重的威胁。目前临床上的抗流感病毒药物主要是靶向病毒蛋白，如M2离子通道阻滞剂（如金刚烷胺）和神经氨酸苷酶抑制剂（如奥司他韦），但已出现了对这些药物耐药的病毒毒株，故急需寻找新的抗病毒靶点。由于流感病毒感染细胞需要大量的宿主因子的协助，对病毒生长至关重要的宿主因子便成为了潜在的药物靶标。流感病毒进入宿主细胞是感染的第一步，抑制流感病毒进入靶细胞可有效地阻断病毒传播。除了靶向对进入必需的病毒蛋白(如血凝素蛋白HA)之外，还可以靶向协助病毒进入的宿主蛋白。通过查阅文献发现，SNX10主要分布在内体膜上，能与v-ATPase相互作用，激活质子泵，在细胞内形成巨大的酸性空泡。此外，v-ATPase是细胞中主要的质子泵，其介导的内体酸化是病毒进入细胞的必需过程。由于SNX10调节空泡酸化过程与流感病毒诱导的内体酸化过程相似，推测流感病毒感染后，SNX10可能通过与v-ATPase相互作用参与内体的酸化，从而参与病毒的进入。重要的是，由于许多病毒使用相似的进入途径，靶向抑制SNX10可能可以开发出新的广谱抗病毒药物。<br>　　目的：<br>　　本课题选用SNX10为研究对象，探究SNX10对流感病毒感染的调控作用，并进一步阐明其作用机制，致力于寻找宿主因子以对抗流感病毒，为寻找新的抗病毒靶点提供依据和思路。<br>　　方法：<br>　　1.RT-PCR、Western blotting、CHX蛋白合成抑制实验、MG-132蛋白酶体抑制实验、泛素化实验检测流感病毒感染后SNX10蛋白在细胞内的调控。<br>　　2.RNAi实验、过表达实验、空斑形成实验和间接免疫荧光实验检测SNX10对流感病毒感染的调控作用。<br>　　3.中性红染色、Lysotracker red染色、免疫共聚焦实验、免疫荧光共定位实验研究SNX10对流感病毒感染的调控作用机制。<br>　　结果：<br>　　1.流感病毒感染细胞或Poly(I∶C)处理细胞后，细胞内SNX10的表达上调;流感病毒感染后，SNX10mRNA表达没有显著变化，但SNX10在细胞内的泛素化水平下调。<br>　　2.细胞沉默SNX10后，流感病毒NP蛋白的表达降低，子代释放水平减少;相反地，外源性过表达SNX10后，流感病毒NP蛋白的表达上调，子代释放水平增加。<br>　　3.细胞沉默SNX10后，细胞核内NP蛋白的表达减少;而外源性过表达SNX10后，核内NP蛋白的表达增加。<br>　　4.外源性过表达SNX10后，细胞内形成空泡，且SNX10可与v-ATPase结合诱导空泡酸化。<br>　　5.流感病毒感染诱导细胞产生酸性内体，SNX10与流感病毒刺激形成的酸性内体发生共定位，敲低SNX10后可抑制流感病毒诱导的酸性内体的产生。<br>　　结论：<br>　　1.流感病毒感染细胞后，可通过抑制SNX10的泛素化降解，稳定细胞内SNX10蛋白的表达水平，保证流感病毒的复制。<br>　　2.SNX10对流感病毒的感染具有调控作用。<br>　　3.SNX10影响流感病毒感染的早期阶段。<br>　　4.SNX10可诱导细胞形成酸性空泡。<br>　　5.SNX10参与形成流感病毒进入宿主细胞所诱导的内体酸化。