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摘要酶法脱胶是一种新兴的脱胶工艺，具有反应条件温和、脱胶完全、油脂得率高、能耗低和污染小等优点。国内外有大量学者将磷脂酶用于植物油脱胶研究，均取得了良好的脱胶效果，但游离磷脂酶容易失活且难以循环利用，导致成本增加，限制了工业化应用。磷脂酶的固定化能改进这些不足。选择一种合适的酶固定化材料是实现高酶活力和高稳定性的关键。磁性纳米粒子(MNPs)由于具备超顺磁性、高比表面积和低毒性等特点而成为酶固定化材料的研究热点。本文合成环氧基修饰MNPs，并使用该粒子分别固定化磷脂酶A1(PLA1)、磷脂酶A2(PLA2)，研究固定化条件对相对酶活和固定化率的影响，探究固定化PLA1、PLA2的酶学性质，并将固定化PLA1、PLA2应用于菜籽油脱胶，通过单因素和响应面试验优化脱胶条件，为固定化酶脱胶在工业化应用提供支持。具体研究结果如下:<br>　　(1)采用传统共沉淀法制备MNPs，利用3-（2，3-环氧丙氧）丙基三甲氧基硅烷(GPTMS)改性MNPs，得到环氧基修饰磁性纳米粒子(MNPs-GPTMS)。通过滴定法测得MNPs-GPTMS表面环氧基含量为0.0125mmol/g，X-射线衍射(XRD)、扫描电镜(SEM)等表征显示环氧基修饰在MNPs表面，因此，MNPs-GPTMS具有固定化酶的潜力。<br>　　(2)通过测定三种游离磷脂酶(PLA1、PLA2和磷脂酶B(PLB))在不同pH值和温度条件下的酶活力变化曲线，获得温度、pH值变化对游离磷脂酶酶活力的影响。选择以酶活力更高、pH值和温度耐受性更好的PLA1、PLA2作为后续固定化酶及其用于菜籽油脱胶的研究对象。<br>　　(3)通过单因素试验，得到PLA1固定化制备的较佳工艺条件:缓冲液pH4.0、反应时间2.0h、反应温度20℃、酶液添加量3.0mL/g，在此条件下，固定化PLA1的酶活力为3600U/g，固定化率为61.1％。与游离PLA1相比，固定化PLA1在热、储藏稳定性方面具有更好的效果。将固定化PLA1用于菜籽油脱胶，根据单因素和响应面试验得到最佳脱胶反应条件:固定化PLA1添加量90.00mg/kg、反应pH6.0、反应温度54℃、脱胶时间4.5h，在此条件下，脱胶油磷含量降至1.450mg/kg。固定化PLA1具有较好的可重复使用性，在最佳脱胶条件下脱胶，重复使用10个批次后，仍保留54.1％的酶活力。<br>　　(4)通过单因素试验，得到PLA2固定化制备的较佳工艺条件:缓冲液pH2.5、反应时间2.0h、反应温度20℃、酶液添加量4.0mL/g，在此条件下，固定化PLA2的酶活力为2850U/g，固定化率为73.1％。与游离PLA2相比，固定化PLA2在储藏稳定性方面表现出更好的效果。将固定化PLA2用于菜籽油脱胶，根据单因素和响应面试验得到最佳脱胶反应条件:固定化PLA2添加量100.00mg/kg、反应pH5.6、反应温度55℃、脱胶时间4.5h，在此条件下，脱胶油磷含量为2.520mg/kg。固定化PLA2还具有可重复利用的优点，脱胶10次后，仍保留其初始活性的51.1％。