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摘要细胞内固醇的正确分布对哺乳动物细胞的很多生物学功能，如膜组成、信号转导等都是至关重要的，其中动物细胞中含量最多的固醇为胆固醇(cholesterol)。胆固醇在细胞内的分布有多种调节机制，包括吸收、合成、排出以及转运等途径，其中胆固醇转运又可以分为囊泡运输(vesicular transport)和非囊泡运输(nonvesicular transport)。研究表明非囊泡运输主要由脂转运蛋白LTPs(Lipid Transfer Proteins)介导，LTPs家族中的一类为StARKin超家族，其成员包括StART(steroidogenic acute regulatory protein-related lipid transfer)、LAMs(LTPs anchored at membrane contact sites)及其它含有StART domain(SD)的蛋白。膜接触位点（Membrane Contact Sites，MCS）是两个细胞器或细胞膜间距离在30nm之内的紧密相邻的区域，是真核细胞脂质交换研究热点。作为近年新发现的StARKin超家族脂转运蛋白成员，LAMs蛋白含有特异性结合并转运固醇的结构域StART domain(SD)，能在内质网(endoplasmic reticulum，ER)与其他生物膜的接触位点间转运固醇。LAMs家族蛋白从酵母到哺乳动物中都是保守的，在人源中有三个同源蛋白成员LAMa-c/GramD1a-1c，酵母中有六个同源蛋白成员Lam1-6。<br>　　本论文对人源LAMs蛋白（hLAMb，hLAMc）脂质结合转运功能结构域StART domain(SD)进行了一系列研究。在本论文的工作中，主要完成了以下几项工作:<br>　　(1)体外构建hLAMb，hLAMc StART结构域的重组克隆，经大肠杆菌表达体系表达，筛选可溶蛋白;<br>　　(2)经过亲和层析纯化、离子交换层析纯化、凝胶过滤层析纯化过程，获得hLAMb，hLAMc StART结构域纯度及浓度均较好的蛋白;<br>　　(3)通过荧光实验检测了蛋白hLAMb，hLAMc StART结构域结合固醇(DHE)、磷酸肌醇(PIPs)、磷脂酰丝氨酸(PS)的能力。实验结果证明hLAMb，hLAMc蛋白能够结合固醇类脂质，但不能结合PIPs和PS;<br>　　(4)根据脂质结合实验结果，制备hLAMb，hLAMc与固醇的复合物，并进行结晶条件的筛选，同时对未结合脂质配体的hLAMb，hLAMc蛋白也进行了结晶条件的筛选;<br>　　(5)到目前为止，只获得了hLAMc的晶体。